[发明专利]一种蛋白质-多酚共价复合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于食品科学和食品添加剂技术领域，具体涉及一种蛋白质-多酚共 价复合物及其制备方法和应用。

背景技术

β-胡萝卜素作为类胡萝卜素的一种，具有较强的抗氧化活性，能够有效降低 心血管疾病和癌症的发病率，提高人体免疫力。然而，β-胡萝卜素为脂溶性化合 物，很难应用于水溶液体系；而且对光、热和氧敏感，容易发生降解；体内吸 收少，生物利用率低，这明显限制了β-胡萝卜素在食品和医药等领域的广泛应 用。将β-胡萝卜素制备成乳状液不仅可以解决β-胡萝卜素的溶解性问题，而且 可以提高其稳定性，同时还具有靶向性和缓释等优点。

小分子表面活性剂是制备乳状液常用的乳化剂，如专利CN200710119789.2 采用tween40、tween60或tween80制备水分散型β-胡萝卜素浓缩液。与表面活 性剂相比，来源于植物和动物的天然蛋白质具有较高的生物利用率，而且安全 性较高，乳化性好，可用于构建以乳状液为基础的传递系统，对β-胡萝卜素具 有更好的保护作用。采用单一蛋白质为乳化剂制备的β-胡萝卜素乳状液虽然安 全性好，但易受温度、pH值、离子强度等的影响，理化稳定性差。

植物多酚具有芳环结构并结合一个或多个羟基，是目前研究最受关注的一 类天然抗氧化剂。近年来对多酚物质在人体内生理活性的研究表明，多酚具有 抗氧化、清除自由基、抑制肿瘤、抗诱变、降低毛细管通透性、改善人体微循 环等多种药理作用，且具有高效、低毒、高生物利用率的特点，因此被广泛应 用于食品工业、生物医药、卫生保健、日用化工等领域。

现有研究表明，蛋白质与多酚的复合物能够提高乳状液的化学稳定性，有 效降低活性物质的降解速率。

发明内容

本发明的目的在于提供一种蛋白质-多酚共价复合物及其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，所述的制备方法为：利用蛋白质 与多酚的自由基接枝聚合反应或碱诱导反应，制备蛋白质-多酚共价复合物。

所述制备方法之一是利用蛋白质与多酚的碱诱导反应，具体步骤为：

将多酚溶解于pH值为8.0-10.0的缓冲液或pH值为8.0-10.0的去离子水中， 形成多酚溶液；将蛋白质溶解于pH值为8.0-10.0的缓冲液或pH值为8.0-10.0 的去离子水中，形成蛋白质溶液；所述蛋白质溶液与多酚溶液中，蛋白质与多 酚的质量比为(20:1)-(2:1)；

在室温或50-60℃的水浴加热条件下，将多酚溶液与蛋白质溶液等体积混 合，形成混合溶液，并调节混合溶液的pH值为8.0-10.0；然后向反应容器中缓 慢通入氧气，反应18-36h，反应过程不断搅拌，使得多酚氧化成醌类化合物并 与蛋白质的侧链氨基酸反应生成蛋白质-多酚共价复合物；将反应后的样品超声 透析并进行真空冷冻干燥，得到蛋白质-多酚共价复合物固体样品；

所述制备方法之二是利用蛋白质与多酚的自由基接枝聚合反应，具体步骤 为：

将蛋白质溶解在去离子水中，加入双氧水和抗坏血酸，室温下静置反应， 形成蛋白质溶液；然后按蛋白质与多酚的质量比为(20:1)-(2:1)，向蛋白质溶 液中加入多酚，在室温下继续静置反应24-48h，将反应后的样品超声透析并进 行真空冷冻干燥，得到蛋白质-多酚共价复合物固体样品。

所述的蛋白质为大豆分离蛋白、乳蛋白、血清蛋白、卵蛋白、鱼糜蛋白、 明胶或胶原蛋白；所述的乳蛋白为α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白或酪蛋 白；

所述的多酚为表没食子儿茶素没食子酸酯、绿原酸、没食子酸、阿魏酸、 儿茶素、花青素或橙皮素。

所述的蛋白质的用量为10g/L-200g/L；双氧水的用量为2g/L-12g/L；抗坏 血酸的用量为2g/L-10g/L；

两种制备方法中，多酚与蛋白质的质量比均为(1:5)-(1:10)。

所述的超声透析的方法为：在20-106KHz的超声频率下，将透析袋固定于 装有去离子水的透析容器内，透析24-48h，每隔3-6h换一次去离子水，确保未 反应的游离多酚完全透析出去；

所述透析袋截留的分子为3500-4000道尔顿，透析温度为4-8℃。

所述的缓冲液为磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液。