[发明专利]一种蛋白质-多酚共价复合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法 为：利用蛋白质与多酚的自由基接枝聚合反应或碱诱导反应，制备蛋白质-多酚 共价复合物。

2.根据权利要求1所述的一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，其特征 在于，所述制备方法之一是利用蛋白质与多酚的碱诱导反应，具体步骤为：

将多酚溶解于pH值为8.0-10.0的缓冲液或pH值为8.0-10.0的去离子水中， 形成多酚溶液；将蛋白质溶解于pH值为8.0-10.0的缓冲液或pH值为8.0-10.0 的去离子水中，形成蛋白质溶液；所述蛋白质溶液与多酚溶液中，蛋白质与多 酚的质量比为(20:1)-(2:1)；

在室温或50-60℃的水浴加热条件下，将多酚溶液与蛋白质溶液等体积混 合，形成混合溶液，并调节混合溶液的pH值为8.0-10.0；然后向反应容器中缓 慢通入氧气，反应18-36h，反应过程不断搅拌；将反应后的样品超声透析并进 行真空冷冻干燥，得到蛋白质-多酚共价复合物固体样品；

所述制备方法之二是利用蛋白质与多酚的自由基接枝聚合反应，具体步骤 为：

将蛋白质溶解在去离子水中，加入双氧水和抗坏血酸，室温下静置反应， 形成蛋白质溶液；然后按蛋白质与多酚的质量比为(20:1)-(2:1)，向蛋白质溶 液中加入多酚，在室温下继续静置反应24-48h，将反应后的样品超声透析并进 行真空冷冻干燥，得到蛋白质-多酚共价复合物固体样品。

3.根据权利要求1所述的一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，其特征 在于，所述的蛋白质为大豆分离蛋白、乳蛋白、血清蛋白、卵蛋白、鱼糜蛋白、 明胶或胶原蛋白；所述的乳蛋白为α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白或酪蛋 白；

所述的多酚为表没食子儿茶素没食子酸酯、绿原酸、没食子酸、阿魏酸、 儿茶素、花青素或橙皮素。

4.根据权利要求2所述的一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，其特征 在于，所述的蛋白质的用量为10g/L-200g/L；双氧水的用量为2g/L-12g/L；抗 坏血酸的用量为2g/L-10g/L；

两种制备方法中，多酚与蛋白质的质量比均为(1:5)-(1:10)。

5.根据权利要求2所述的一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，其特征 在于，所述的超声透析的方法为：在20-106KHz的超声频率下，将透析袋固定 于装有去离子水的透析容器内，透析24-48h，每隔3-6h换一次去离子水；

所述透析袋截留的分子为3500-4000道尔顿，透析温度为4-8℃。

6.根据权利要求2所述的一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法，其特征 在于，所述的缓冲液为磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液。

7.权利要求1-6任一项所述的一种蛋白质-多酚共价复合物的制备方法制备 的蛋白质-多酚共价复合物。

8.权利要求7所述的蛋白质-多酚共价复合物在制备β-胡萝卜素乳状液中 的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用采取的方法为：将 蛋白质-多酚共价复合物溶解于水中，得到水相；将β-胡萝卜素溶解于植物油中， 得到油相；然后将水相与油相按(20:1)-(10:1)的体积比混合，在8000-12000r/min 的条件下剪切乳化6-10min，再进行高压均质，得到β-胡萝卜素乳状液；

所述的高压均质方式为：在温度为45-75℃的条件下，采用二级加压，均质 1-5次；其中，一级均质压力为30-60Mpa，二级均质压力为3-6Mpa。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述水相中蛋白质-多酚共 价复合物的浓度为5g/L-50g/L；油相中β-胡萝卜素的浓度为0.5g/L-10g/L。