[发明专利]O型口蹄疫病毒抗体检测卡及其制备方法

权利要求书

1.一种O型口蹄疫病毒抗体检测卡，包括装配在外壳内的检测卡本体，其特征在于：所述检测卡本体包括底板，在底板上依次设置样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述标记垫由载体基层和标记物组成，标记物为载体基层上喷涂镧系荧光检测微球和镧系荧光质控微球形成的一层膜，所述检测微球和质控微球均为表面带有羟基或氨基的硅胶微球或聚苯乙烯微球，且检测微球和质控微球的粒径均为50～500nm，所述硝酸纤维素膜上包被O型口蹄疫抗原为检测线，包被羊抗鸡抗体为质控线，在外壳上对应样品垫开设加样孔，对应硝酸纤维素膜上的检测线和质控线开设视窗孔。

2.根据权利要求1所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：所述底板为PVC底板,在PVC底板上从左至右依次粘贴样品垫、标记垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，且样品垫的右端搭在标记垫的左端上，标记垫的右端搭在硝酸纤维素膜的左端上，吸水纸左端搭在硝酸纤维素膜的右端上。

3.根据权利要求1所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：所述检测微球为标记有O型口蹄疫抗原的微球，质控微球为标记有鸡lgY或兔lgG的质控微球。

4.根据权利要求3所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：所述硝酸纤维素膜上的检测线和标记垫上采用的O型口蹄疫抗原均为灭活O型口蹄疫病毒抗原、O型口蹄疫疫苗或O型口蹄疫结构蛋白VP1、VP2和VP3的重组蛋白；所述硝酸纤维素膜上质控线采用的羊抗鸡抗体为羊抗鸡lgY的lgG或者羊抗兔lgG。

5.根据权利要求3所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：所述标记在生物原料上的镧系荧光微球的镧系荧光是指镧系元素Eu、Sm或Tb与β－二酮配基产生的荧光。

6.根据权利要求1所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：所述样品垫为检测血清或血浆的样品垫，或者为检测全血的样品垫。

7.根据权利要求1所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：本检测卡利用猪血样品中O型口蹄疫病毒抗体、O型口蹄疫病毒抗原的标记物和硝酸纤维素膜上包被O型口蹄疫病毒抗原通过双抗原夹心法来检测猪血样本中O型口蹄疫病毒抗体。

8.根据权利要求1所述的O型口蹄疫病毒抗体检测卡，其特征在于：本检测卡为定量层析检测卡，它是通过检测仪检测层析后检测卡的检测线和质控线发出的荧光信号，然后根据此批检测卡的IC卡储存的标准曲线，再由检测线和质控线的荧光信号从标准曲线计算出待检物的浓度。

9.一种O型口蹄疫病毒抗体检测卡的制备方法，其特征在，包括以下步骤：

步骤一，把硝酸纤维素膜粘贴在PVC底板上，并在硝酸纤维素膜上喷涂已稀释至0.2～0.5mg/ml的羊抗鸡lgY的lgG形成质控线和已稀释至0.3～1.0mg/ml的O型口蹄疫病毒抗原形成检测线，烘制后备用；

步骤二，用封闭液封闭硝酸纤维素膜10～30分钟，用10mM磷酸缓冲液清洗硝酸纤维素膜10～30分钟，干燥后备用；

步骤三，制备标记有鸡lgY的镧系荧光微球和标记有O型口蹄疫抗原的镧系荧光微球；

步骤四，把标记有鸡lgY和标记有O型口蹄疫抗原的镧系荧光微球并分别稀释至浓度0.05～0.4μg/ml和1～8μg/ml，并将其喷涂在载体基层上构成标记垫，烘制后备用；

步骤五，把样品垫、标记垫、吸水纸依次粘在PVC底板上，组装成大卡，再用剪切机切割成试纸条，装配在检测卡外壳内，即得到O型口蹄疫病毒抗体检测卡。