[发明专利]一种鉴别空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌双重PCR引物及其鉴别方法在审
| 申请号: | 201610027763.4 | 申请日: | 2016-01-15 | 
| 公开(公告)号: | CN105420404A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 | 
| 发明(设计)人: | 郭东春;曲连东;刘家森;刘春国;刘大飞 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 | 
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 | 
| 代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 侯静 | 
| 地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 鉴别 空肠 弯曲 杆菌 结肠 双重 pcr 引物 及其 鉴别方法 | ||
1.一种鉴别空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌双重PCR引物,其特征在于包括以下引物对:
hipOFATCAACATTGCGAGATAC;
hipORTAGACTTACAAGGCGAAT;
cdtCFGGATATGCACTCTCAAGATTTG;
cdtCRCTTGCTTAGTTCGGTTACAATAG。
2.一种鉴别空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌的双重PCR方法,其特征在于它是按照以下步骤进行的:
一、提取待检测样本的基因组DNA;
二、以步骤一的基因组DNA为模板,将权利要求1的引物对放入同一PCR反应体系中,进行PCR扩增;
三、PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳;
四、对扩增片进行分析:在653bp和313bp位置有两条扩增条带,表示样品为阳性,待检测样品中含有空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌。
3.根据权利要求1所述的一种鉴别空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌的双重PCR方法,其特征在于PCR扩增的PCR体系如下:
PCR扩增条件:95℃预变性5min;95℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸30s,30个循环,最后72℃延伸5min。
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