[发明专利]霍乱弧菌荧光PCR检测试剂盒在审
| 申请号： | 201610024815.2 | 申请日： | 2016-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN105648054A | 公开（公告）日： | 2016-06-08 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 江苏和创生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/63 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212009 江苏省镇江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 霍乱弧菌 荧光 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种用于特异性检测样品中霍乱弧菌核酸的试剂盒，同时用于定性区分O1和O139群，其中包括PCR反应液、酶混合液、阴性质控品和阳性质控品；PCR反应液中用于核酸扩增反应的引物序列如下：
P1-1：5`-atattgatccgacaagcccaaatg-3`，
P1-2：5`-cgatgttgaggcgaagtttagg-3`，
P2-1：5`-tgatgttgtgggataagcaatctt-3`，
P2-2：5`-ctcagcaatgcggtggtcta-3`，
PCR反应液中用于荧光信号监测的寡核苷酸探针的序列如下：
Probe1：5`-X1-cgccgcaatacgagccccaaggt-Y1-3`，
Probe2：5`-X2-aacccgcccttctaatgaacacgcca-Y2-3`，
Probe1荧光报告基团X1为FAM，荧光淬灭基团Y1为Eclipse，
Probe2荧光报告基团X2为CY5，荧光淬灭基团Y2为BHQ。
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征还在于PCR反应体系为20μl，包括2×PCR缓冲液10μl、10mmol/LdNTP1.0μl、25μmol/L引物各0.5μl、10μmol/L探针0.2μl、热启动Taq酶混合液0.4μl、样品DNA2μl，加灭菌水至终体系20μl。
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