[发明专利]一种树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎HSK模型的构建、评估方法及其应用在审
| 申请号: | 201610023595.1 | 申请日: | 2016-01-14 |
| 公开(公告)号: | CN105535997A | 公开(公告)日: | 2016-05-04 |
| 发明(设计)人: | 李丽红;周巨民;陈桂俊;杨卫;郎丰超;杨丽萍;王二林;李欣;李卓然 | 申请(专利权)人: | 中国科学院昆明动物研究所 |
| 主分类号: | A61K49/00 | 分类号: | A61K49/00 |
| 代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 赛晓刚 |
| 地址: | 650223 *** | 国省代码: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 种树 单纯 疱疹 病毒性 角膜炎 hsk 模型 构建 评估 方法 及其 应用 | ||
1.一种树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的构建方法,其特征在于将HSV-1病毒 经树鼩眼睛接种感染HSV病毒,建立树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型,包括以 下步骤:
(1)实验动物准备:准备6月-3岁龄雌性成年健康树鼩;
(2)树鼩的麻醉及处理:用氯胺酮麻醉动物,将树鼩固定于专用的小布袋中, 称量并记录其体重,在树鼩大腿内侧肌肉丰厚处注射盐酸氯胺酮,5分钟后,树 鼩处于麻醉状态;
(3)病毒感染:将HSV-1病毒滴加到树鼩两只眼膜上,即可得到树鼩单纯疱疹 病毒性角膜炎模型。
2.根据权利要求1所述的树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的构建方法,其特征 在于:步骤(3)中所述的HSV-1病毒为野生型HSV-117+或HSV-1McKrae毒 株。
3.根据权利要求1所述的树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的构建方法,其特征 在于:步骤(2)中所述的氯胺酮的用量为按树鼩体重为50mg/kg~100mg/kg。
4.根据权利要求2所述的树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的构建方法,其特征 在于:步骤(3)中当采用HSV-117+病毒时,需要以1ml注射器针头划痕动物 眼膜,即建立表面划痕,横竖各划痕十次,然后将HSV-117+病毒滴加到树鼩 眼膜。
5.根据权利要求1所述的树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的构建方法,其特征 在于:步骤(3)中采用的病毒感染剂量为1×104PFU/眼睛~1×106PFU/眼睛。
6.一种评估树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的方法,其特征在于:取材病毒感 染树鼩的眼睛组织,利用裂隙灯检查、qPCR、qRT-PCR、免疫组化、原位杂交、 体外共培养实验、组织活病毒检测及病毒基因组定量等方法,对树鼩眼睛组织的 感染、病毒潜伏及重激活进行研究分析,鉴定及评估树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎 模型。
7.一种树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型的应用,其特征在于:用本方法构 建的树鼩单纯疱疹病毒性角膜炎模型在单纯疱疹病毒性角膜炎的发病、机 制机理研究和治疗以及药物评价方面的应用。
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