[发明专利]适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法有效
| 申请号： | 201610016466.X | 申请日： | 2016-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN105445451B | 公开（公告）日： | 2017-04-12 |
| 发明（设计）人： | 陈建起;鲍冬芹;谭玉华 | 申请（专利权）人： | 广州市丰华生物工程有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53 |
| 代理公司： | 广州三环专利代理有限公司44202 | 代理人： | 郝传鑫,宋静娜 |
| 地址： | 510730 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 适用于 时间 分辨 荧光 免疫 方法 | ||
1.一种适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：包括：将样本加入固相载体包被反应板中，向每孔中加入缓冲液，然后加入标记物工作液，所述标记物工作液的浓度允许在所述缓冲液与标记物工作液的体积均不大于50μL时与所述样本中的待测物质充分结合。
2.如权利要求1所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：所述样本中的待测物质为甲胎蛋白、新生儿促甲状腺激素、风疹病毒IgM、弓形虫IgM、巨细胞病毒IgM和单纯疱疹病毒IgM中的至少一种。
3.如权利要求1所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：当所述样本中的待测物质为甲胎蛋白时，所述加样方法为：将样本加入固相载体包被反应板中，向每孔中加入20～30μL缓冲液，然后加入3～7μL标记物工作液；其中，所述标记物工作液通过将甲胎蛋白单克隆抗体与镧系元素离子螯合物按5:1～5的质量比混合制得母液，再将母液用缓冲液稀释200～300倍而成。
4.如权利要求3所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：所述缓冲液的制备方法为：在含0.01g/L的乙二胺四乙酸二钠的50mmol/L、pH7.8的Tris-Hcl溶液中加入10.0ml/L～200.0ml/L的小牛血清、牛γ-球蛋白和鼠IgG中的至少一种。
5.如权利要求1所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：当所述样本中的待测物质为新生儿促甲状腺激素时，所述加样方法为：将样本加入固相载体包被反应板中，向每孔中加入40～50μL缓冲液，然后加入40～50μL标记物工作液；其中，所述标记物工作液通过将新生儿促甲状腺激素单克隆抗体与镧系元素离子螯合物按10：5～10的质量比混合制得母液，再将母液用缓冲液稀释300～400倍而成。
6.如权利要求5所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：所述缓冲液的制备方法为：在含0.01g/L的乙二胺四乙酸二钠的50mmol/L、pH7.8的Tris-Hcl溶液中加入10.0ml/L～200.0ml/L的小牛血清、Tween40和鼠IgG中的至少一种。
7.如权利要求1所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：当所述样本中的待测物质为风疹病毒IgM时，所述加样方法为：将样本加入固相载体包被反应板中，再立即向每孔中加入20～30μL生物素化抗原，孵育5～10min，再向每孔中加入20～30μL缓冲液，然后加入20～30μL标记物工作液；其中，所述标记物工作液通过将链霉亲和素与镧系元素离子螯合物按1:1～5的质量比混合制得母液，再将母液用缓冲液稀释400～800倍而成。
8.如权利要求7所述的适用于时间分辨荧光免疫法的加样方法，其特征在于：所述缓冲液的制备方法为：在含0.01g/L的乙二胺四乙酸二钠的50mmol/L、pH7.8的Tris-Hcl溶液中加入10.0ml/L～200.0ml/L的小牛血清和鼠IgG中的至少一种。
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