[发明专利]一种极速获得分生孢子的方法有效
| 申请号: | 201610013554.4 | 申请日: | 2016-01-07 |
| 公开(公告)号: | CN105483073B | 公开(公告)日: | 2017-11-10 |
| 发明(设计)人: | 李文佳;吕延华;李全平;张宗耀 | 申请(专利权)人: | 广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司 |
| 主分类号: | C12N3/00 | 分类号: | C12N3/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 523808 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 获得 分生孢子 方法 | ||
1.一种获得分生孢子的方法,其特征在于,以蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅为载体,中国被毛孢子囊孢子不经历菌丝生长阶段,直接产生分生孢子;
所述方法包括以下步骤:
1)将中国被毛孢子囊孢子溶液均匀涂抹于蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅的表面;
2)将涂抹有中国被毛孢子囊孢子的蝙蝠蛾幼虫、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅分别置于垫有湿滤纸的培养皿内,保持温度12~18℃,相对湿度60~90%,在避光的无菌环境下培养24~96h;
3)对蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅表面进行洗脱,收集分生孢子;
其中步骤1)中所述中国被毛孢子囊孢子溶液,子囊孢子的浓度为4500~5500个/ml。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中的中国被毛孢子囊孢子溶液,包含具有保湿和粘附作用的溶剂。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述溶剂为2~5%甘油水溶液。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中的将中国被毛孢子囊孢子溶液均匀涂抹于蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅的表面,涂抹工具为柔性工具。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述柔性工具为毛笔、布条或棉签。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤1)中的将中国被毛孢子囊孢子溶液均匀涂抹于蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅的表面,每个载体的涂抹量为15~25μl。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤2)中的湿滤纸为保证滤纸上肉眼可见水,倾斜无水流动。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤3)中的对蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕、或蝙蝠蛾成虫翅表面进行洗脱,洗脱液为含0.1%吐温80的0.003mol/l KH2PO4缓冲液。
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