[发明专利]一种极速获得分生孢子的方法有效

专利信息
申请号: 201610013554.4 申请日: 2016-01-07
公开(公告)号: CN105483073B 公开(公告)日: 2017-11-10
发明(设计)人: 李文佳;吕延华;李全平;张宗耀 申请(专利权)人: 广东东阳光药业有限公司;宜昌山城水都冬虫夏草有限公司
主分类号: C12N3/00 分类号: C12N3/00
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 523808 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 获得 分生孢子 方法
【权利要求书】:

1.一种获得分生孢子的方法,其特征在于,以蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅为载体,中国被毛孢子囊孢子不经历菌丝生长阶段,直接产生分生孢子;

所述方法包括以下步骤:

1)将中国被毛孢子囊孢子溶液均匀涂抹于蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅的表面;

2)将涂抹有中国被毛孢子囊孢子的蝙蝠蛾幼虫、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅分别置于垫有湿滤纸的培养皿内,保持温度12~18℃,相对湿度60~90%,在避光的无菌环境下培养24~96h;

3)对蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅表面进行洗脱,收集分生孢子;

其中步骤1)中所述中国被毛孢子囊孢子溶液,子囊孢子的浓度为4500~5500个/ml。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中的中国被毛孢子囊孢子溶液,包含具有保湿和粘附作用的溶剂。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述溶剂为2~5%甘油水溶液。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)中的将中国被毛孢子囊孢子溶液均匀涂抹于蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅的表面,涂抹工具为柔性工具。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述柔性工具为毛笔、布条或棉签。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤1)中的将中国被毛孢子囊孢子溶液均匀涂抹于蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕或蝙蝠蛾成虫翅的表面,每个载体的涂抹量为15~25μl。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤2)中的湿滤纸为保证滤纸上肉眼可见水,倾斜无水流动。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤3)中的对蝙蝠蛾幼虫体表、蝙蝠蛾幼虫虫蜕、或蝙蝠蛾成虫翅表面进行洗脱,洗脱液为含0.1%吐温80的0.003mol/l KH2PO4缓冲液。

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