[发明专利]一种PD-L1抗体及其制备方法

说明书

本发明公开了一种PD‑L1抗体及其制备方法。所述PD‑L1抗体包括PD‑L1抗体的重链可变区重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3中的一种或多种，和PD‑L1抗体的轻链可变区轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3中的一种或多种。所述PD‑L1抗体是全人源的，对PD‑L1蛋白具有高亲和力，能有效阻止PD‑L1蛋白与PD‑1和B7.1结合，并且在人混合淋巴细胞或T淋巴细胞中显著增加IFN‑γ和IL‑2的表达量。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种PD-L1抗体及其制备方法。

背景技术

PD-L1(B7H1)，是B7家族的成员之一，是一个阅读框含有290个氨基酸的I型跨膜蛋白，由免疫球蛋白V-like、C-like区域、疏水跨膜区及C端胞内区组成(Dong H，Zhu G，Tamada K，Chen L.Nature Med.1999；5:1365–1369)，其基因位于人染色体的9p24位点。PD-L1的RNA转录分布广泛，在淋巴器官(如脾、骨髓、淋巴、胸腺)和非淋巴器官(如心脏、肌肉、胎盘、肺、肾脏、肝脏)中均被检测到。PD-L1在抗原递呈细胞，如巨噬细胞、树突状细胞表面呈组成型表达。并且，PD-L1在广泛的组织和细胞类型都能够表达，如在上皮细胞和内皮细胞中，可以被促炎症因子如IFN-γ等诱导表达。许多新鲜分离的肿瘤组织高表达PD-L1。PD-L1与恶性肿瘤的进程与预后相关。PD-L1的受体有二：一是PD-1，PD-1在活化的T细胞和B细胞上表达，也在活化的骨髓瘤细胞中表达。PD-1与PD-L1的结合可以抑制T细胞的增殖，激活下游抑制信号，从而使肿瘤细胞逃逸机体免疫系统的识别和攻击。体内实验表明，用可阻断PD-1与PD-L1结合的PD-1抗体或PD-L1抗体可使CTL细胞扩增，加速肿瘤缩小和病毒清除。PD-L1的另一受体是B7.1，B7.1在活化的T细胞有表达，作为PD-L1的抑制性受体，B7.1与PD-L1的结合可以激活下游抑制信号，抑制T细胞的增殖，体内表现为T细胞耐受的形成。

最近研究表明，一些慢性病毒感染和癌症通过造成PD-1/PD-L1介导的T细胞耗竭来实现免疫逃逸。许多人源肿瘤细胞和肿瘤相关抗原呈递细胞高水平表达PD-L1，从而逃避抗肿瘤免疫反应(Sheng Yao，Yuwen Zhu，and Lieping Chen，Nat Rev DrugDiscov.2013February；12(2):130–146)。慢性HIV感染过程中，HIV特异性CD8+T细胞功能受损，产生细胞因子和效应分子能力降低，增殖能力减弱。有研究表明，在HIV感染个体中，HIV特异性CD8+T细胞中PD-1高表达，提示阻断PD-1/PD-L1通路提供了治疗HIV感染和艾滋病患者的潜在治疗方法(Bowers NL，Helton ES，Huijbregts RPH，et al.PLoSPathog.2014March；10(3):e1003993)。总之，阻断PD-1/PD-L1通路的药物为多种癌症，HIV感染以及其他疾病和与T细胞耗竭相关的情况提供了新的治疗方法。因此，迫切需要可阻断PD-1/PD-L1通路的药物，如PD-L1抗体，尤其是人源化的PD-L1抗体，用于疾病治疗。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服目前缺少PD-L1抗体，尤其是人源化PD-L1抗体的不足，提供一种亲和力高、特异性强的PD-L1抗体及其制备方法。所述的PD-L1抗体与人源和猴源的PD-L1蛋白均具有高度亲和力，能够抑制PD-L1与其受体PD-1和B7.1的结合，能在人混合淋巴细胞或T淋巴细胞反应中显著增加IFN-γ和IL-2的表达水平，并且缺乏与人PD-L2等同类蛋白抗原的交叉反应。