[发明专利]用于生成细胞分裂的血液的方法

说明书

一种用于分析全血样本的方法可包含：将全血注射到双区样本环的第一区中，将足够的热或能量施加到所述全血以分裂所述全血样本的所述细胞组分从而产生细胞分裂的血液，以及将足够体积的缓冲剂注射到所述双区样本环中以将所述细胞分裂的血液移动到所述双区样本环的第二区中。所述方法可进一步包含：将多端口值切换到注射位置，使所述细胞分裂的血液从所述双区样品环流入固相萃取柱中，以及将所述细胞分裂的血液的组分从所述固相萃取柱洗脱到液相色谱柱中。

技术领域

本发明大体上涉及质谱领域，包含用于生成细胞分裂的血液的系统和方法。

背景技术

识别和量化来自生物流体的样本中的分析物可需要复杂且冗长的预处理程序，以便从流体样本去除细胞组分，例如全血中的红细胞、白细胞和凝血细胞。为了分析血液样本，这些细胞组分可必须通过处理前程序(例如，离心、过滤、沉积和/或使用化学反应剂或机械处理通过裂解均质化)来去除。然而，这些程序可能难以集成为自动测试格式。这也适用于目标分析物存在于细胞组分中的情形，例如红细胞中的免疫抑制药物。在此情况下，在添加裂解反应剂之前，可通过离心和/或过滤来隔离或富集细胞组分，或可通过将变性剂添加到原始样本(例如，ZnSO₄与乙腈的混合物)来使细胞组分变性，或用-20℃到-170℃的温度处理原始样本。

可使用液相色谱法(LC)将混合物中的组分分离，以识别每种组分并量化每种组分。依赖泵将含有样本混合物的加压液体溶剂通过填充有固态吸附物质的柱。样本中的每种组分可以不同方式与吸附物质略微相互作用，从而致使不同组分具有不同迁移速率且导致组分在其流出柱时分离。

质谱(MS)被广泛用于识别和量化样本中的化合物。在质谱中，根据离子的质量/电荷(m/z)比率来分离离子，且依据m/z而测量离子丰度。一般来说，质谱仪具有三个主要组件：用于产生离子的离子源，用于通过m/z分离离子的质量分析器和用于检测经m/z分离的离子的检测器。

与质谱组合的液相色谱法(LC-MS)可提供对复杂样本的自动分析：首先基于穿过色谱柱的不同迁移速率来分离组分，且接着用质谱仪识别并量化样本的组分。然而，具有细胞组分的生物样本可能例如通过要求预处理以去除细胞组分或片段而破坏对样本中的组分的全自动分析。将需要用于处理全血以分解并去除残余细胞片段的在线系统。

全文特此以引用的方式并入本文中的美国专利案第7,799,579号公开了一种在分裂细胞组分但避免样本的粘度显著增大的状况下热处理生物样本的方法。通过在10秒与40秒之间的时间段内将样本维持在60℃与90℃之间的温度下，生物样本的细胞组分大体上定性地分裂而不导致流体组分的实质性沉积、沉淀、变性、凝集或胶凝。

由前所述，将了解，需要用以生成细胞分裂的血液且提供对全血的全自动分析的改进的系统和方法。

发明内容

在第一方面中，一种分析全血样本的方法可包含：将缓冲剂、所述全血样本和内标物装载到针筒或针筒环中，将多端口阀切换到装载位置，将所述内标物和所述全血注射到双区样本环的第一区中，将足够的热或能量施加到所述全血以分裂所述全血样本的所述细胞组分从而产生细胞分裂的血液，以及将足够体积的所述缓冲剂注射到所述双区样本环中以将所述细胞分裂的血液移动到所述双区样本环的第二区中。所述方法可进一步包含：将所述多端口值切换到注射位置，使所述细胞分裂的血液从所述双区样本环流入固相萃取柱中，以及将所述细胞分裂的血液的组分从所述固相萃取柱洗脱到液相色谱柱中。

在第一方面的各种实施例中，所述方法可进一步包含将所述细胞分裂的血液的组分从所述液相色谱柱洗脱到质量分析器。

在第一方面的各种实施例中，所述方法可进一步包含基于保留时间、质量、碎片质量或其任何组合而识别所述细胞分裂的血液的组分。

在第一方面的各种实施例中，所述全血样本可在所述第一区中驻留足以分裂所述全血样本的所述细胞组分的时间。