[发明专利]稳定的反应混合物

权利要求书

1.一种干燥的反应混合物组合物，其用于通过聚合酶链式反应（PCR）和逆转录酶聚合酶链式反应（RT-PCR）进行核酸扩增，所述组合物包含至少一种核酸扩增相关酶、核苷酸三磷酸、醋酸锰(Mn(OAc)₂)和糖，其中通过在没有冷冻干燥存在下干燥呈含水形式的反应混合物组合物制备所述组合物，其中所述糖选自蔗糖、海藻糖、右旋糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、环糊精、麦芽糊精或葡聚糖。

2.根据权利要求1的组合物，所述组合物还包含至少一种选自适体、去污剂、缓冲剂、盐和寡核苷酸的组分。

3.根据权利要求1或2中的任一项的组合物，其中所述至少一种核酸扩增相关酶是选自以下的热稳定的聚合酶：水生栖热菌（Thermus aquaticus）Taq DNA聚合酶、栖热菌属（Thermus sp.）Z05聚合酶、黄栖热菌（Thermus flavus）聚合酶、海栖热袍菌（Thermotogamaritima）聚合酶、那不勒斯栖热袍菌（Thermotoga neapolitana）聚合酶、TMA-25聚合酶、TMA-30聚合酶、Tth DNA聚合酶、以及经修饰的热稳定的聚合酶或它们的任意组合。

4.根据权利要求1-3中的任一项的组合物，其中所述糖以一定量存在，所述量使得如果在水溶液中重构所述组合物，所述糖的浓度是在50 mM至1000 mM之间。

5.根据权利要求1-4中的任一项的组合物，其中所述糖是蔗糖。

6.根据权利要求1-5中任一项的组合物，其中干燥在环境温度下执行。

7.一种制备根据权利要求1-6中任一项的干燥的反应混合物组合物的方法，所述方法包括：在没有冷冻干燥存在下干燥含水形式的反应混合物，其中所述含水形式的反应混合物包含至少一种核酸扩增相关酶、核苷酸三磷酸、醋酸锰(Mn(OAc)₂)和糖，其中所述糖选自蔗糖、海藻糖、右旋糖、乳糖、麦芽糖、海藻糖、环糊精、麦芽糊精或葡聚糖。

8.根据权利要求7的方法，所述方法在环境温度下执行。

9.根据权利要求7或8中的任一项的方法，其中所述糖在含水形式的反应混合物中的浓度是在50 mM至1000 mM之间。

10.根据权利要求7-9中的任一项的方法，其中所述糖是蔗糖。

11.根据权利要求7-10中的任一项的方法，其中所述至少一种核酸扩增相关酶是选自以下的热稳定的聚合酶：水生栖热菌Taq DNA聚合酶、栖热菌属Z05聚合酶、黄栖热菌聚合酶、海栖热袍菌聚合酶、那不勒斯栖热袍菌聚合酶、TMA-25聚合酶、TMA-30聚合酶、Tth DNA聚合酶、以及经修饰的热稳定的聚合酶或它们的任意组合。