[发明专利]用于即用型PCV2/M.hyo组合疫苗的方法

说明书

本发明描述了用于制备抗原组合物的方法，该抗原组合物可用于制备用于猪的即用型疫苗，以用于预防或减少M.hyo或PCV2的感染以及疾病的相关症状。所述方法的特征在于，其包括将PCV2抗原与吸附至氢氧化铝佐剂的M.hyo抗原的预先形成的抗原/佐剂复合物混合的步骤。这样可以制备出PCV2/M.hyo组合疫苗，其单次施用后已经对单一或组合感染时的M.hyo和PCV2的感染和疾病高度有效。此外，所述疫苗在施用时具有非常好的安全性，是即用型，并且在经济上是可行的。

本发明涉及兽医的领域，也即涉及用于猪的抗猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)以及抗2型猪圆环病毒的疫苗。具体而言，本发明涉及用于制备包含疫苗抗原的组合物的新方法。此组合物继而允许生产用于猪的有效的即用型组合疫苗。另外，本发明还涉及可通过所述新方法获得的抗原组合物的用途、从该抗原组合物制备的疫苗、以及所述抗原组合物和所述疫苗的各种方法和用途。

猪肺炎支原体(M.hyo)是引起(猪)地方流行性肺炎(EP)的主要原因，EP是在全世界发生的猪慢性呼吸道疾病。在较早的文献中使用客观同义词：猪肺炎枝原体(M. suipneumoniae)，指代同一细菌。该细菌相对较小，缺少细胞壁，并且属于柔膜菌纲(Mollicute)。尤其是年幼的小猪易受此高度传染性的疾病的侵害，并且传播通常是空气传播的或者是通过直接接触。

源于M.hyo的肺部疾病大部分是免疫介导的病理，导致实变肺炎(consolidatedpneumonia)。虽然并不分泌突出的毒素，但该细菌定殖在并且破坏肺纤毛上皮，导致纤毛活性的丧失。根据居住条件以及环境压力，此疾病的问题最大的后果是，其使得容易受到其它细菌和病毒病原体对猪呼吸系统的不同继发性感染。这引起所谓的：猪呼吸道疾病综合征(PRDC)，展现出严重的肺部病变。在动物的不适之外，由于生长速率和饲料转化率的表现降低、以及通过兽医护理和抗生素使用的成本，EP和PRDC导致猪产业严重的经济损失(Thacker Minion，2012，Mycoplasmosis，in：Disease of swine, 10th ed., J. Wiley Sons, p. 779 - 797)。

与PRDC相关的其它猪病原体为：病毒如：2型猪圆环病毒，猪流感病毒，和猪繁殖与呼吸综合征病毒；以及细菌如：副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)，出血败血性巴斯德菌(Pasteurella multocida)，猪链球菌(Streptococcus suis)和胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)。

由于抗生素仅部分有效，针对M.hyo相关疾病和生产损失的主要治疗是通过疫苗接种，优选在生命的早期。作为综述，参见：Maes等人(2008，Vet. Microbiol., vol. 126,p. 297-309)。通常在保育期，至4周龄，对小猪进行疫苗接种，任选在几周后进行加强疫苗接种。

通过疫苗诱导的抗M.hyo免疫来对疾病进行控制的确切机制并未完全了解。虽然疫苗接种并不能完全预防肺部定殖或者细菌传播，但是疫苗接种在实质上减少临床症状，如肺部定殖、肺部病变、和肺炎，减少脱落、以及恢复经济表现，如平均每日增重方面是有效的。为了监测疫苗效力，可以对不同的临床疾病参数进行评分和监测，如发病率、肺炎、胸膜炎，以及还通过对重分离的M.hyo进行检测和定量，如通过血清学、组织学、或PCR。