[发明专利]卡非佐米的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于纯化卡非佐米的方法，特别是还原通常在合成卡非佐米(Carfilzomib)期间形成的乙酰胺杂质。

背景技术

卡非佐米，(2S)-N-{(1S)-1-苄基-2-[((1S)-3-甲基-1-{[(2R)-2-甲基环氧乙烷-2-基]羰基}丁基)氨基]-2-氧代乙基}-4-甲基-2-({(2S)-2-[(吗啉-4-基乙酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}氨基)戊酰胺由式I代表:

卡非佐米(CFZ，以商品名Kyprolis，Onyx Pharmaceuticals，Inc.出售)是四肽环氧酮和选择性蛋白酶抑制剂。它是环氧素(epoxomicin)的类似物。

美国食品和药物管理局(FDA)于2012年7月20日批准了它与来那度胺和地塞米松联合使用于具有复发性多发性骨髓瘤并已接受1-3次前线(prior line)治疗的患者。它还被指示用于多发性骨髓瘤患者，所述患者已经接受至少两种先前疗法、包括采用硼替佐米的治疗和免疫调节治疗并且在最后一次治疗完成后60天或前述60天之内已经表明了疾病进展。以式I表示的卡非佐米首先在WO 05105827/美国专利号7,417,042中公开。

美国专利号7,417,042；7,232,818和8,207,297描述了制备卡非佐米的方法。方案被概述如下在方案1中：

方案1

其中，“Boc”是指叔丁氧基羰基；Bz和Bn分别表示苯甲酰基和苄基：MeCN表示乙腈；TFA表示三氟乙酸；DMF是指二甲基甲酰胺；DCM表示二氯甲烷；DIEA是指二异丙基乙胺；HOBT是指羟基苯并三唑；PyBop是指苯并三唑-1-基-氧三吡咯烷鏻六氟磷酸盐。由此得到的卡非佐米在甲醇和水的存在下结晶，过滤分离。

还有另一个过程描述于Pharmacophore；Micheal Screen,等人J.Biol.Chem.2010,285:40125-40134。方案概述如下在方案2中：

方案2

其中，“HBTU”表示N,N,N',N'-四硝基-O-(1H-苯并三唑-1-基)脲阳离子六氟磷酸盐。由此得到的卡非佐米通过柱色谱纯化。

US 8,367,617公开了卡非佐米的结晶形式，卡非佐米的盐，其中盐抗衡离子选自柠檬酸根，酒石酸根，三氟乙酸根，甲磺酸根，甲苯磺酸根，氯离子和溴离子。

不幸的是，式II的乙酰胺杂质，

在美国专利号7,417,042，7,232,818和8,207,297中描述的现有技术方法中不可避免地形成，并且这种杂质难以与期望的最终产物分离。即使通过使用包括再结晶在内的不同纯化方法，杂质保持不需要的量。

因此，仍然需要制定有效和经济的纯化程序，特别是在工业规模上使用。

本发明人现在已经发现通过减少式II的乙酰胺杂质(以下称为乙酰胺杂质)的量而不使用潜在的耗时结晶和重结晶技术或昂贵的色谱法来纯化卡非佐米的方法。相反，发明人已经发现，去除这种杂质的最佳方法是通过采用弱酸形成卡非佐米的适当的盐。令人惊奇的是，发现卡非佐米的草酸盐用作本发明方法中的中间体使得效果更好。最后，卡非佐米的草酸盐通过与碱反应而转化为卡非佐米，其中由此得到的卡非佐米具有少于0.10wt％的乙酰胺杂质。

发明概述

为了提供改进的商业上可行的用于纯化式I卡非佐米的方法，

本发明的过程是在工业规模上实施的容易且成本有效的方法。

本发明的另一个目的是提供一种用于纯化式I的卡非佐米以在最终卡非佐米中将式II的乙酰胺杂质降低至0.10wt％以下或低于0.10wt％的方法。

本发明的另一个目的是避免用于分离和纯化卡非佐米的柱/快速色谱法。

本发明的另一个目的是生产式III的卡非佐米的草酸盐，

其可以用作制备卡非佐米的中间体，以在最终卡非佐米中将式(II)的乙酰胺杂质降低至0.10wt％以下或低于0.10wt％。

因此，如反应方案3中所示，开发了纯化式I的卡非佐米的方法。

方案3

根据本发明，从式II乙酰胺杂质纯化式I卡非佐米包括以下步骤：

(i)将粗制卡非佐米溶解在第一溶剂中并加入草酸形成草酸卡非佐米；

(ii)沉淀所述草酸卡非佐米；