[发明专利]用于制备具有高细胞稳定性的含PUFA生物质的方法

说明书

本发明涉及用于制备具有高细胞稳定性的含PUFA生物质的方法。

现有技术中已经描述了用于制备含有多不饱和脂肪酸(PUFA)的生物质的方法。在所获得的生物质的情形中的问题经常是细胞壁的稳定性。细胞壁不可以过于不稳定，否则存在的油可能过早释放而不饱和脂肪酸会就此而氧化。另一方面，细胞壁也不可以过于稳定，否则在生产饲料期间，细胞没有完全破碎和/或细胞的破碎需要很高的能量输入，并且油也因而不能完全从细胞释放或者仅在很高的能量输入(因而高成本)下才行。

因而本发明的目的是提供这样的方法，其中所获得的生物质的细胞稳定性适宜于生物质进一步加工成饲料并且其必需是不太高也不太低。

根据本发明，出乎意料地发现，可以通过具体将硫酸盐添加至发酵培养基来优化细胞壁的稳定性。

就此而言，这表明了可以通过添加一定量的硫酸盐(从而在所得的生物质中产生25-60g/kg的硫酸盐浓度)来获得最佳的细胞稳定性。

还有，这表明了如此获得的生物质可以很低的能量输入来进一步加工成具有高抗磨损性和高水稳定性的饲料。

另外，这表明了使用本发明的生物质获得的饲料可特别有利地用于养殖鱼类。

本发明的另一方面因此可以认为是提供生物质，所述生物质(由于其性质)在特别好的程度上能够适宜于进一步加工成饲料。

因此本发明首先提供了用于制备含多不饱和脂肪酸(PUFA)生物质的方法，特征在于生物质的制备包括在发酵培养基中培养微生物，所述发酵培养基含有一定量的硫酸盐从而在所得的生物质中产生25-60g/kg的硫酸盐浓度(基于干物质)。就此而言，所得的生物质中的硫酸盐浓度优选为25-50g/kg、特别是25-40g/kg、特别优选25-35g/kg(每种情形都基于干物质)。

本发明类似地还提供了可以使用本发明方法获得的含PUFA生物质。

本发明类似地提供了含PUFA生物质，其具有25-60g/kg的硫酸盐含量(基于干物质)，并且优选可以通过上文所述的方法获得。所述硫酸盐含量优选为25-50g/kg、特别是25-40g/kg、特别优选25-35g/kg(每种情形都基于干物质)。

根据本发明，"硫酸盐含量"理解为是指硫酸盐的总含量，也即游离的或结合的(特别是有机结合的)硫酸盐的含量。可以认为生物质中存在硫酸盐大部分是作为表多糖的组分存在的，其参与微生物细胞壁的形成。

根据本发明，所述硫酸盐含量优选是通过查明所获得生物质的硫含量来确定的，因为生物质中存在的大部分的硫都可归因于存在的硫酸盐。归因于其它来源的硫由于存在的硫酸盐的量而可以忽略。因而，所存在的硫酸盐的量可以容易的从查明的硫的量来确定。

就此而言，生物质的硫含量优选通过依照DIN EN ISO 11885的元素分析来确定。为了对生物质的硫含量进行分析，在分析前优选用硝酸和过氧化氢在240℃压力下来破坏样品的适宜等分试样，以便确保存在的硫的自由可接近性.

本发明因此还进一步提供了用于制备含多不饱和脂肪酸(PUFA)的生物质的方法，特征在于生物质的制备包括在发酵培养基中培养微生物，所述发酵培养基含有一定量的硫酸盐从而在所得的生物质中通过依照DIN EN ISO 11885的元素分析可以检测到8-20g/kg的硫含量(基于干物质)。就此而言，所得的生物质中的硫含量优选为8-17g/kg、特别是8-14g/kg、特别优选8-12g/kg(每种情形都基于干物质)。

本发明因此还进一步提供了含PUFA生物质，特征在于通过依照DIN EN ISO 11885的元素分析可以检测到8-20g/kg的硫含量(基于干物质)。就此而言，所得的生物质中的硫含量优选为8-17g/kg、特别是8-14g/kg、特别优选8-12g/kg(每种情形都基于干物质)。

根据本发明，本发明生物质的磷含量就干物质而言优选为1-6g/kg、特别是2-5g/kg。所述磷含量同样优选通过依照DIN EN ISO 11885的元素分析来查明。

本发明的生物质优选包含细胞，并且优选主要由已天然产生PUFA的细胞组成；然而，所述细胞也可以是通过适宜的基因技术方法而使得其可以产生PUFA的细胞。在此背景下，所述产生可以是自养的、混合营养的、或异养的。

优选地，生物质的细胞是异养产生PUFA的那些。根据本发明，所述细胞优选采用藻类、真菌(特别是酵母)、或原生生物的形式。所述细胞特别优选为微藻或真菌。