[发明专利]用于癌症免疫疗法的ROR1(NTRKR1)特异性的嵌合抗原受体

说明书

本发明涉及嵌合抗原受体(CAR)，其是能够重定向对于挑选的膜抗原的免疫细胞特异性和反应性的重组嵌合蛋白质,以及更特别地，其中结合胞外配体是来源于ROR1单克隆抗体的scFV,其赋予对抗ROR1阳性细胞的特异性免疫。具有这样的CAR的工程化的免疫细胞特别地适于治疗淋巴瘤和白血病,以及实体瘤例如乳腺、结肠、肺和肾脏肿瘤。

发明领域

本发明涉及嵌合抗原受体(CAR)，其是能够重定向对于ROR1的免疫细胞特异性和反应性的重组嵌合蛋白质，ROR1是在大多数骨髓细胞上发现并且被用于在患者中诊断慢性淋巴细胞白血病(CLL)或实体瘤例如乳腺、结肠、肺和肾脏肿瘤的细胞表面糖蛋白。当其在T细胞或NK细胞中被表达时，根据本发明所述的CAR特别地可用于治疗带有ROR1抗原的恶性细胞。所产生的工程化的免疫细胞展示高水平的对于恶性细胞的特异性,赋予免疫疗法以安全性和效率。

发明背景

过继性免疫疗法涉及离体产生的自体抗原特异性的T细胞的转移,是一种有前途的用来治疗病毒感染和癌症的策略。用于过继性免疫疗法的T 细胞可以或者通过抗原特异性的T细胞的扩增或者通过遗传工程重定向T 细胞而产生(Park,Rosenberg等人2011)。病毒抗原特异性的T细胞的转移是一种得到确认的用于治疗与移植相关联的病毒感染和与稀有病毒有关的恶性肿瘤的方法。已经显示肿瘤特异性的T细胞的分离和转移在治疗黑素瘤方面是成功的。

通过转基因T细胞受体或嵌合抗原受体(CAR)的遗传转移，已经成功地在T细胞中产生了新的特异性(Jena,Dotti等人2010)。在图1中呈现了 3代的CAR的略图。CAR是合成的受体，其由与单个融合分子中一个或更多个信号传导结构域缔合的靶向部分组成。一般而言,CAR的结合部分由单链抗体(scFv)的抗原结合结构域组成，包含通过柔性接头连接的单克隆抗体的轻并且可变的片段。也已经成功地使用了基于受体或配体结构域的结合部分。第一代CAR的信号传导结构域源自于CD3ζ的胞质区或Fc受体γ链。已经显示第一代CAR成功地重定向T细胞的细胞毒性。然而, 它们未能提供持续的扩增和体内抗肿瘤活性。已经添加了来自共刺激分子的信号传导结构域以及跨膜和铰链结构域来形成第二和第三代的CAR,导致在人中某些成功的治疗性试验,其中可以重定向T细胞使其对抗表达 CD19的恶性细胞(June等人,2011)。然而,针对CD19 ScFv使用的信号传导结构域、跨膜结构域和共刺激结构域的特定组合是相当抗原特异性的并且不能被扩展到任何抗原标记。

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是由执业血液学家管理的一种最通常诊断的白血病。持续多年，患有CLL的患者一直被看作类似的具有长的自然史并且仅仅边际有效的治疗，其很少产生完全应答。最近,与V_H突变状态和相关联的ZAP-70过表达、破坏的p53功能和染色体畸变的生物学显著性相关的几个重要的观察已经导致能够鉴定处于早期疾病发展和弱生存力的高风险的患者。与这些研究同时,包括核苷类似物、单克隆抗体利妥昔单抗和阿仑单抗在内的几种治疗已经被引入。当被用作有症状的CLL的初始治疗时，这些治疗的组合在临床试验中已经导致高度完全的和总的响应速率。因此,CLL和治疗的初始风险分层化的复杂性已经显著地增大了。此外,当这些初始治疗没有效果时,对患有氟达拉滨顽固性疾病的CLL患者的方法可能是相当具有挑战性的(Byrd J.C等人,2014)。