[发明专利]用于快速并且灵敏地检测热点突变的方法有效
申请号: | 201580045332.4 | 申请日: | 2015-08-24 |
公开(公告)号: | CN106795563B | 公开(公告)日: | 2021-08-06 |
发明(设计)人: | H·严;Y·何;R·杨;B·H·迪普拉斯;L·汉森;D·比格纳 | 申请(专利权)人: | 杜克大学 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/63 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 王永伟;赵蓉民 |
地址: | 美国北卡*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 快速 并且 灵敏 检测 热点 突变 方法 | ||
1.一种测试具有肿瘤的人类的身体样品的试剂盒,其包含:
包含SEQ ID NO:2、3、5、6、8和9的扩增引物组,其中每个引物包含选自SEQ ID NO:2、3、5、6、8和9的序列以产生包含TERT启动子以及IDH1序列的扩增产物,其中SEQ ID NO:2、5和8的所述引物中的每一个在其3'端处包含LNA修饰的核苷酸。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于测试基因组肿瘤DNA。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于测试已经历预扩增的基因组肿瘤DNA。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于在≥66℃下扩增循环的至少一部分。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于在≤60℃下扩增所述循环的一部分。
6.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于利用定量PCR来进行扩增。
7.根据权利要求3所述的试剂盒,进一步包含高保真度DNA聚合酶。
8.根据权利要求3所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于采用≥66℃的退火温度的预扩增。
9.根据权利要求3所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于采用≥68℃的退火温度的预扩增。
10.根据权利要求3所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于进行作为多重反应的预扩增。
11.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于测试身体样品,所述身体样品选自:脑脊髓液(CSF)、血液、淋巴、血清、血浆、尿液、唾液、粘液以及泪液。
12.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于测试身体样品,所述身体样品是活检样品。
13.根据权利要求1所述的试剂盒,其中所述试剂盒用于测试身体样品,所述身体样品是针抽吸物。
14.根据权利要求1所述的试剂盒,其中标签序列连接到所述引物中的至少一个的5'端。
15.根据权利要求1所述的试剂盒,其能够检测野生型拷贝背景中的0.1%突变基因组DNA拷贝,并且能够区分0.1%突变基因组DNA拷贝与0%突变基因组DNA拷贝。
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