[发明专利]一种TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR、其制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201580018308.1 | 申请日： | 2015-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN108026181B | 公开（公告）日： | 2021-07-02 |
| 发明（设计）人： | 陈守春;徐琦;闫娟;黄先洲;魏利佳;胡海洋 | 申请（专利权）人： | 成都华创生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C07K14/525;C12N15/28;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人： | 黄冠华 |
| 地址： | 610041 四川省成都市高新*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 trail 双靶点 突变 蛋白 mur6s4tr 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR，其特征在于，该突变蛋白的N端第2～11位既包含穿膜肽序列RRRRRR，又包含凋亡抑制因子XIAP的结合序列AVPI；所述突变蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2。
2.一种权利要求1所述的TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
A、cDNA片段扩增与克隆；
B、表达载体的构建与鉴定；
C、重组TRAIL双靶点突变蛋白的表达；
D、TRAIL双靶点突变蛋白的纯化；
E、TRAIL双靶点突变蛋白的鉴定。
3.根据权利要求2所述的TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR的制备方法，其特征在于，步骤B中，表达载体的构建与鉴定步骤包括：
B1、将原核表达载体中的融合标签序列切除；
B2、将优化后编码TRAIL双靶点突变蛋白的cDNA序列克隆于原核表达载体上以获得高效可溶性非融合表达。
4.根据权利要求3所述的TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR的制备方法，其特征在于，步骤B1中，所述原核表达载体为pET 32a。
5.根据权利要求2所述的TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR的制备方法，其特征在于，步骤C中，重组蛋白的表达时，诱导温度为18～30℃。
6.权利要求1所述的TRAIL双靶点突变蛋白MuR6S4TR在制备抗胰腺癌、肺癌、结肠癌及乳腺癌药物中的应用。
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