[发明专利]一种多肽聚合物毛细管等电聚焦分析方法

权利要求书

1.一种多肽聚合物的分析方法，其特征在于采用毛细管等电聚焦方法，包括以下步骤：

1)配制毛细管等电聚焦上样液，所述上样液为包括两性电解质、凝胶液、等电点标记物与待分析的多肽聚合物样品的混合液；

2)将步骤1)的上样液上样于毛细管柱，在15～30℃、10～40kV下聚焦2～25min，在10～40kV迁移20～50min；并通过毛细管等电聚焦仪或毛细管电泳仪检测，得到等电聚焦谱图；

3)通过等电点标记物计算出多肽混合物各组分的等电点，通过各组分等电点数值；

4)采用步骤1)-3)相同条件对多肽聚合物标准品进行检测，将标准品和样品的各组分等电点数值与各组分峰型进行对照。

2.根据权利要求1所述的多肽聚合物的分析方法，其中，所述凝胶液选自甲基纤维素、尿素、羟丙基甲基纤维素、甘油、蔗糖、精氨酸、亚氨基二乙酸中的一种或多种的混合物。

3.根据权利要求1-2任一项所述的多肽聚合物的分析方法，其中，所述两性电解质载体选自Pharmalyte2.5-5、Pharmalyte 3-10、Pharmalyte 4-6.5、Pharmalyte4.2-4.9、Pharmalyte4.5-5.4、Pharmalyte5-6、Pharmalyte5-8、Pharmalyte6.7-7.7、Pharmalyte8-10.5、Servalyt2-4、Servalyt2-9、Servalyt2-11、Servalyt3-4、Servalyt3-5、Servalyt3-6、Servalyt3-7、Servalyt3-10、Servalyt4-5、Servalyt4-6、Servalyt4-7、Servalyt4-9、Servalyt5-6、Servalyt5-7、Servalyt5-8、Servalyt5-9、Servalyt6-7、Servalyt6-8、Servalyt6-9、Servalyt7-9、Servalyt9-11中的一种或多种的混合物(优选为Pharmalyte 8-10.5与另一种两性电解质载体的混合物，更优选二者的比例为1:0.5-2)；两性载体在上样液中的体积范围为1％-10％。

4.根据权利要求1-3任一项所述的多肽聚合物的分析方法，其中，步骤2)中是以20-40kV下聚焦9-20min，优选是以25-30kV下聚焦9-15min。

5.根据权利要求1-4任一项所述的多肽聚合物的分析方法，其中，步骤2)中是在30-40kV下迁移40-50min，优选是在30kv下迁移40-45min。

6.根据权利要求1-5任一项所述的多肽聚合物的分析方法，其中，所述上样液中包含三种以上等电点标记物。

7.根据权利要求1-6任一项所述的多肽聚合物的分析方法，其中，所述多肽聚合物选自醋酸格拉替雷、利拉鲁肽、杜拉鲁肽、普兰林肽。

8.一种多肽聚合物药物质量检测方法，其包括以下步骤：

1)配制毛细管等电聚焦上样液，所述上样液为包括两性电解质、凝胶液、等电点标记物与待分析的多肽聚合物样品的混合液；

2)将步骤1)的上样液上样于毛细管柱，在15～30℃、10～40kV下聚焦2～25min，在10～40kV迁移20～50min；并通过毛细管等电聚焦仪或毛细管电泳仪检测，得到等电聚焦谱图；

3)通过等电点标记物计算出多肽混合物各组分的等电点，通过各组分等电点数值与各组分的峰型考察峰型也需要考察；

4)采用步骤1)-3)相同条件对多肽聚合物标准品进行检测，将标准品和样品的各组分等电点数值与各组分峰型进行对照。