[发明专利]一种碳纳米管固定化漆酶及其用途

权利要求书

1.一种碳纳米管固定化漆酶，其特征在于，采用以下步骤制备：

一、碳纳米管的表面功能化

1)、将碳纳米管进行琥珀酰亚胺基的接枝；

2)、将步骤1)得到的琥珀酰亚胺基接枝的碳纳米管进行氨基三乙酸功能团的接枝；

3)、将步骤2)得到的碳纳米管进行铜离子鳌合修饰；

二、对漆酶进行脱铜离子处理；

三、将表面功能化的碳纳米管和脱除铜离子的漆酶混合，在室温条件下搅拌，进行漆酶固定化反应，然后经离心分离、洗涤后获得碳纳米管固定化漆酶；

所述碳纳米管进行琥珀酰亚胺基的接枝的方法为：

1)、将1重量份的卤代琥珀酰亚胺完全溶解于15～45重量份的丙酮；

2)、将0.5～2重量份碳酸钾、1～2.5焦亚硫酸钾、3～12份羧基化碳纳米管

在30～90重量份的水中充分混合至无机盐完全溶解；

3)、将1)与2)溶液混合，在20～40℃下，搅拌速率为300-1000r/min，反应20-40min；

4)、加入氯仿与水进行萃取分离，然后经洗涤、旋转蒸发得到琥珀酰亚胺基接枝碳纳米管；

所述碳纳米管进行氨基三乙酸功能团接枝的方法为：

1)、接枝反应溶液的制备

将N,N-二(羧基甲基)-L-赖氨酸水合物和三乙胺加入到二甲基甲酰胺中，搅拌加热回流使二者完全溶于二甲基甲酰胺中；

2)、将琥珀酰亚胺基接枝的碳纳米管放入接枝反应溶液中，搅拌加热回流，接枝反应结束后离心、洗涤、干燥，获得表面氨基三乙酸功能化的碳纳米管；所述接枝反应溶液包括1重量份的N,N-二(羧基甲基)-L-赖氨酸水合物、2～6重量份的三乙胺和20～60重量份的二甲基甲酰胺，接枝反应的温度为30～60℃；

对漆酶进行脱铜离子处理的方法为：将漆酶加入到含有乙二胺四乙酸二钠的一元醇和水的混合溶液中，搅拌反应后离心，洗涤，收集沉淀，得到脱除铜离子的漆酶；

所述的一元醇为C1-C4的直链或支链烷基一元醇中的任意1种或几种的组合；所述一元醇和水的混合物中水的含量为3-10％(v/v)；乙二胺四乙酸二钠的浓度为0.1-0.5g/L；

脱除铜离子的反应温度为10～20℃，搅拌速度为100～300r/min，反应时间为60-120min。

2.如权利要求1任一项所述的一种碳纳米管固定化漆酶，其特征在于，接枝反应的搅拌速度为300～600r/min，反应时间为3～6h。

3.如权利要求1所述的一种碳纳米管固定化漆酶，其特征在于，所述的碳纳米管为羧基化的碳纳米管，每克碳纳米管上漆酶负载量为40～80mg。

4.如权利要求1所述的碳纳米管固定化漆酶用于生物检测和电化学分析、生物燃料电池、环境污染物的降解和染料脱色、有机合成、废水处理。