[发明专利]诱导间充质干细胞定向分化为Leydig细胞的方法及其用途

说明书

本发明涉及诱导间充质干细胞定向分化为Leydig细胞的方法及其用途。进一步地，本发明涉及体外诱导间充质干细胞定向分化为Leydig细胞的组合物及其用途。

技术领域

本发明涉及体外诱导间充质干细胞定向分化为Leydig细胞的领域。进一步地，本发明涉及体外诱导间充质干细胞定向分化为Leydig细胞的组合物。

背景技术

干细胞是组织再生的源泉，根据个体发育过程中出现的先后次序，干细胞可分为胚胎干细胞(embryonic stem cells，ESCs)和成体干细胞(adult stem cells，ASCs)；根据分化潜能的不同，又可将其分为全能干细胞(totipotent stem cel1)、多潜能干细胞(pluripotent stem cel1)、多能干细胞(multipotent stem cel1)和单能干细胞(unipotent stem cel1)。成体干细胞还可根据组织来源分为造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肌肉干细胞等。通过基因转染技术将某些转录因子导入动物或人的体细胞，使体细胞被诱导重构成为ES细胞样的多潜能干细胞，这种多潜能干细胞被称为诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)，参见Takahashi K.YamanakaS.Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adultfibroblast cultures by defined factors.Cell,2006,126(4):663-676；Takahashi K,Tanabe K,Ohnuki M,et a1.Induction of pluripotent stem cells from adult humanfibroblasts by defned factors.Cell,2007,131(5):861-872。因发育阶段、取材及获得方式等不同，胚胎干细胞、成体干细胞及iPS细胞在临床应用上显示出不同的优势和局限性。胚胎干细胞具有分化的全能性，但伦理问题、免疫排异与成瘤性特点严重阻碍了其在临床上的研究与应用。iPS具有与胚胎干细胞类似的分化能力，但其仍具有成瘤性，而且从成体细胞诱导生成iPS的效率极低，诱导生成的iPS癌变率较高，这些因素大大增加了临床应用的不安全性。成体干细胞来源非常广泛，无成瘤性，亦不存在伦理问题。传统的观点认为成体干细胞属多能或单能干细胞。近年来的一些实验证据显示，成体干细胞具有“可塑性”，不仅能分化为特定谱系中的细胞类型，还具有分化为在发育上无关的其他谱系的能力，提示成体干细胞具有比人们以前想象的更大的分化潜能，参见Brazelton TR,Rossi FM,Keshet GI,Blau HM.From marrow to brain:expression of neuronal phenotypes inadult mice.Science,2000,290(5497):1775-1779；Jiang Y,jahagirdar BN,ReinardtRL,等人Pluripotency of mesenchymal stem cells derived from adultmarrow.Nature,200,418(6893):41-49；Jiang Y.Henderson D.Blackstad M.等人Neuroectodermal differentiation from mosuse multipotent adult progenitorcells.Proc Natl Acad Sci U S A,2003,100(supp 1):11854-11860。

由于来源较多，目前成体干细胞没有统一的表型、培养条件及鉴定方法。各种组织来源的成体干细胞显示出不同的分化能力。这些因素使得成体干细胞的研究变得复杂混乱，很难建立比较均一的细胞系，因此为进一步的临床应用带来了困难。