[发明专利]一种用于粪便中艰难梭菌分离培养的试剂的使用方法

权利要求书

1.一种用于粪便中艰难梭菌分离培养的试剂的使用方法，其特征在于， 所述试剂为硫磺胆酸钠的酒精溶液，在使用时，包括以下步骤：

1)在粪便中加入硫磺胆酸钠的酒精溶液，混合均匀，得到混合体系；

2)将混合体系静置；

3)将步骤2)静置后的混合体系离心，去除悬浮颗粒；

4)取上清，接种到艰难梭菌选择培养基，厌氧条件下培养；

5)挑选表面粗糙、边缘不齐并产特殊气味的黄色菌落，进行革兰氏染色； 革兰氏染色呈阳性并且有明显火柴头状芽孢的菌落判定为阳性，即为艰难梭 菌；否则判定为阴性，即不是艰难梭菌。

2.根据权利要求1所述一种用于粪便中艰难梭菌分离培养的试剂的使 用方法，其特征在于，步骤1)中，酒精占混合体系的体积百分比为75％， 硫磺胆酸钠占混合体系的质量百分比为0.1％。

3.根据权利要求1所述一种用于粪便中艰难梭菌分离培养的试剂的使 用方法，其特征在于，步骤2)中，静置的时间为1小时。

4.根据权利要求1所述一种用于粪便中艰难梭菌分离培养的试剂的使 用方法，其特征在于，步骤4)中，所述艰难梭菌选择培养基为CCFA选择培 养基。

5.根据权利要求1所述一种用于粪便中艰难梭菌分离培养的试剂的使 用方法，其特征在于，步骤4)中，厌氧条件下培养条件为：30-37℃厌氧培 养箱或厌氧袋培养24h-48h。

6.根据权利要求1至5任一项所述一种用于粪便中艰难梭菌分离培养 的试剂的使用方法，其特征在于，步骤5)之后，再进行以下步骤：将挑选判 定为阳性的菌株通过PCR扩增保守基因进行鉴定。

7.一种组合试剂在粪便中艰难梭菌分离培养中的应用，其特征在于， 所述组合试剂包括硫磺胆酸钠和酒精。

8.根据权利要求7所述一种组合试剂在粪便中艰难梭菌分离培养中的 应用，其特征在于，所述试剂与粪便混合后的总体系中，酒精占总体系的体 积百分比为50％-80％。

9.根据权利要求7所述一种组合试剂在粪便中艰难梭菌分离培养中的 应用，其特征在于，所述的试剂与粪便混合后的总体系中，硫磺胆酸钠占总 体系的质量百分比为0.05％-0.5％。