[发明专利]活跃链霉菌LB-16及利用其制备那西肽的方法

权利要求书

1. 一种活跃链霉菌（Streptomyces actuosus）LB-16，其特征在于，所述活跃链霉菌LB-16被保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为：CGMCCNo.11732，保藏时间为：2015年11月25日。

2.一种利用如权利要求1所述的活跃链霉菌LB-16制备那西肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、在种子培养基上接入所述活跃链霉菌LB-16，于温度为22~28℃，转速为120~150rpm下，振荡培养72~90h，作为一级种子；

B、在种子培养基上接入上述一级种子，于温度为22~28℃，转速为120~150rpm下，振荡培养60~80h后，作为二级种子；

C、将上述二级种子接入装有发酵培养基的发酵罐中，于温度为22~28℃，转速为150rpm，通气量以体积比为1:0.3~0.6，压力为0.6~1.0KPa下，发酵培养120~150h；

D、将步骤C得到的那西肽发酵液加入发酵液体积6~8倍的有机溶剂中，于温度为60~80℃下提取2~4h，得到那西肽粗提液；

E、将上述那西肽粗提液用质量浓度为10%的氢氧化钠溶液调节pH为6~8，搅拌2h，将析出的固体离心分离、水洗、干燥后得到那西肽粗品。

3.如权利要求2所述的利用活跃链霉菌LB-16制备那西肽的方法，其特征在于，还包括：

F、将上述那西肽粗品装填在树脂层析柱中，先用浓度为0.2mol/L的磷酸氢二钠缓冲液平衡所述树脂层析柱，然后用浓度为0.1~0.2mol/L的氢氧化钠溶液梯度洗脱，洗脱液干燥后溶于其3倍体积的乙醇中，加热到80℃完全溶解，然后加入乙醇体积7~10倍的清水，室温下搅拌3h，抽滤出固体，固体用1倍体积的水淋洗，50℃下真空干燥后，得到那西肽精品。

4.如权利要求2所述的利用活跃链霉菌LB-16制备那西肽的方法，其特征在于，所述步骤D中的有机溶剂为乙醇、异丙醇、氯仿或二氯甲烷中的任一种。

5.如权利要求2所述的利用活跃链霉菌LB-16制备那西肽的方法，其特征在于，所述种子培养基包括以重量百分比计的下述成分：豆饼粉2.0~3.0%、葡萄糖3.0~4.0%、玉米浆2.0~3.0%、MgSO₄·7H₂O 0.05~0.1%、（NH₄)₂SO₄·7H₂O 0.3~0.5%和轻质碳酸钙0.5%，所述发酵培养基包括以重量百分比计的下述成分：淀粉6.0~7.0%、蛋白胨0.3~0.5%、黄豆粉7.0~8.0%、NaCl 0.3~0.4%、（NH₄)₂SO₄·7H₂O 0.2～0.3%和轻质碳酸钙0.1～0.2%。