[发明专利]一种中药组合物制剂的指纹图谱的建立方法

说明书

本发明提供一种中药组合物制剂的指纹图谱建立方法，以及采用所述方法建立的指纹图谱来检测所述中药组合物制剂的成分的方法。所述中药组合物制剂的原料组成为狗脊、黑老虎、千斤拔、蒸桑寄生、蒸女贞子、鸡血藤、金樱子、牛大力、盐水制菟丝子；所述指纹图谱的建立方法包括采用高效液相色谱法检测所述中药组合物中各类化合物的保留时间；其中所述高效液相色谱的条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；流动相由乙腈‑甲醇‑0.1％的磷酸水溶液组成，0～150min梯度洗脱；紫外检测波长为230nm。本发明所述方法建立的指纹图谱以原儿茶酸吸收峰为参考峰，标定了43个共有峰的相对保留时间和相对峰面积。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种中药组合物制剂的指纹图谱的建立方法，所述中药组合物为壮腰健肾丸。

背景技术

中药指纹图谱是一种综合的、可量化的质量检测手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂质量的真实性、优良性和稳定性。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。因此，中药指纹图谱的研究和建立，对于提高中药质量，促进中药现代化具有重要意义。

中药组合物指纹图谱的建立，应以系统的化学成分研究和药理学研究为依托，体现系统性、特征性和稳定性三个基本原则。才能保证指纹图谱的标准化、规范化、客观化，从而便于推广和应用。高效液相色谱法(HPLC)具有分离效率高，分析速度快，定量精密度高，检测器种类多，稳定性好等特点。不受样品挥发性和热稳定性的限制，样品中大多数成分均可在高效液相色谱仪上进行分析检测，是构建指纹图谱的主要方法之一。2010版《中国药典》收载了中成药品种共计1069个，但是仅收载了高效液相指纹图谱9项，其中中成药仅6项。可见中成药指纹图谱的建立，绝非易事，需要解决众多的技术问题，花费大量的劳动。

壮腰健肾丸，由狗脊、鸡血藤、黑老虎等九味中药材组成，具有壮腰健肾，养血，祛风湿的作用，用于肾亏腰痛，膝软无力，小便频数，遗精梦泄，风湿骨痛，神经衰弱。壮腰健肾丸收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第三册，标准编号：WS3-B-0538-91，标准中仅有显微鉴别、化学鉴别。

显然，上述药品标准无法全面表征壮腰健肾丸的化学特征和质量情况。因此，有必要研究如何建立壮腰健肾丸的指纹图谱，从而更好地保证临床用药的质量和治疗效果。

发明内容

针对上述问题，本发明的一个目的在于提供一种中药组合物制剂指纹图谱的建立方法，其中所述中药组合物为壮腰健肾丸。本发明利用HPLC-UV技术，建立了壮腰健肾丸指纹图谱共有模式，标定了43个共有峰，其中，确定了5个峰的化学成分归属：原儿茶酸、原儿茶醛、特女贞苷、日本南五味子素甲和(2′S)-南五味子木质素。经检测，10批样品与共有模式之间相似度均大于0.9。以本发明提供的方法稳定性和重现性好，从而提供了比现有技术的检测方法更深层次和更全面的质量评价依据。

为了实现上述发明目的，本发明采用了如下的技术方案：

一种中药组合物制剂的指纹图谱建立方法，所述中药组合物以狗脊、黑老虎、千斤拔、蒸桑寄生、蒸女贞子、鸡血藤、金樱子、牛大力、盐水制菟丝子为原料，通过本领域常用的方法，与药学上可以接受的辅料，制备成临床上可以接受的制剂；所述指纹图谱建立方法包括采用高效液相色谱法检测所述中药组合物制剂中化合物的保留时间，其中所述高效液相色谱的条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；

流动相由A、B和C相组成，其中A相为乙腈，B相为甲醇，C相为体积百分浓度0.05％～0.1％的磷酸水溶液，流速1ml/min，0～150min按照如下程序进行梯度：

0～10min，按照体积百分比，A：B：C＝5％：0％：95％匀速地变化为A：B：C＝10％：0％：90％，