[发明专利]一种中药组合物制剂的指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种中药组合物制剂的指纹图谱建立方法，所述中药组合物制剂以狗脊、黑老虎、千斤拔、蒸桑寄生、蒸女贞子、鸡血藤、金樱子、牛大力、盐水制菟丝子为原料，通过本领域常用的方法，与药学上可以接受的辅料，制备成临床上可以接受的制剂；所述指纹图谱建立方法包括采用高效液相色谱法检测所述中药组合物中各类化合物的保留时间，其中所述高效液相色谱的条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；

流动相由A、B和C相组成，其中A相为乙腈，B相为甲醇，C相为体积百分浓度0.05％～0.1％的磷酸水溶液，流速1ml/min，0～150min按照如下程序进行梯度：

0～10min，按照体积百分比，A：B：C＝5％：0％：95％匀速地变化为A：B：C＝10％：0％：90％，

10～20min，按照体积百分比，A：B：C＝10％：0％：90％，

20～65min，按照体积百分比，A：B：C＝10％：0％：90％匀速地变化为A：B：C＝35％：5％：60％，

65～70min，按照体积百分比，A：B：C＝35％：5％：60％匀速地变化为A：B：C＝40％：10％：50％，

70～95min，按照体积百分比，A：B：C＝40％：10％：50％匀速地变化为A：B：C＝45％：15％：40％，

95～130min，按照体积百分比，A：B：C＝45％：15％：40％匀速地变化为A：B：C＝80％：5％：15％，

130～150min，按照体积百分比，A：B：C＝80％：5％：15％匀速地变化为A：B：C＝90％：0％：10％；

柱温为20℃～40℃；

紫外检测波长为210～280nm。

2.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述C相为体积浓度0.1％的磷酸水溶液。

3.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述柱温为30℃。

4.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述检测波长为230nm。

5.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，还包括通过以下方法制备供试品溶液：

取所述中药组合物制剂5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入极性有机溶剂20～30ml，超声提取、冷浸提取或回流提取，滤过，取续滤液，即得。

6.根据权利要求5所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述极性有机溶剂为体积浓度50％～100％的甲醇或体积浓度50％～95％的乙醇。

7.根据权利要求6所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述极性有机溶剂为100％甲醇。

8.根据权利要求5所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，提取方式为超声提取，提取时间40～50min。

9.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，通过如下方法制备所述供试品溶液：

取所述中药组合物制剂5g，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声45min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

10.根据权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，还包括通过如下方法制备对照品溶液：分别精密称取原儿茶酸、原儿茶醛、特女贞苷、日本南五味子素甲和(2′S)-南五味子木质素J对照品，混合，加甲醇制成浓度为原儿茶酸120μg/ml、原儿茶醛130μg/ml、特女贞苷140μg/ml、日本南五味子素甲40μg/ml和(2′S)-南五味子木质素J30μg/ml的混合对照品溶液，即得。