[发明专利]一种液液萃取-GFAAS法测定一价铜含量的方法

权利要求书

1.一种液液萃取-GFAAS法测定一价铜含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.标准工作曲线的制作：在惰性气体的保护下，将CuCl的标准品用饱和KCl溶液定容，得到1000ppm的亚铜标准溶液；取亚铜标准溶液与pH9的甘氨酸-NaOH缓冲溶液按体积比1:9混合，再向混合溶液中加入等体积的0.06%(w/w)2，2′-联喹啉的正戊醇溶液，混匀，静置分层，取上层有机层用2，2′-联喹啉的正戊醇溶液依次稀释成10、1、0.1、0.01ppm溶液，取0.01ppm溶液1mL上机，制作工作曲线；

S2.一价铜的检测：将样品与等体积20%的三氯乙酸混匀，根据样品含铜量，再与pH9的甘氨酸-NaOH缓冲溶液按不同比例稀释，再向混合溶液中加入1mL的0.06%(w/w)2，2′-联喹啉的正戊醇溶液，混匀，静置分层，取上层有机层，上机用石墨炉原子吸收法测定一价铜含量；

其中，S2所述样品为血清时，取样品的上清液用缓冲溶液稀释20倍；S2所述样品为细胞液、细胞膜液、组织液或尿液时，取样品的上清液用缓冲溶液稀释1倍；S2所述样品为不含蛋白的无机溶液时，直接将样品用缓冲溶液稀释1倍。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S2所述样品为含蛋白的样品时，将样品与三氯乙酸混匀后离心去蛋白，再取去蛋白后的上清液进行后续步骤。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述离心为1200rpm离心10min。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S2所述样品为细胞液、细胞膜液或组织液时，另取未去蛋白前的样品测定蛋白浓度，以蛋白含量定量一价铜浓度。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，S2所述样品来自细胞时，将样品进行如下预处理：培养数天后的细胞收集，超声或冰冻破碎后，分离得到的上清即细胞液，沉淀下来的细胞膜用适量表面活性剂溶解，再作为样品进行测定。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1、S2所述混匀的方法为旋涡振荡1min。

7.据权利要求1所述的方法，其特征在于，S1、S2所述缓冲溶液中的甘氨酸浓度≤0.01mol/L。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，S2所述上层有机层的上机量为500μL。