[发明专利]一种用鸭胆汁中提取的鸭胆酸合成鹅去氧胆酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鹅去氧胆酸的制备方法，具体涉及一种用鸭胆汁中提取的鸭胆酸合成鹅去氧胆酸的方法。

背景技术

鹅去氧胆酸(Chenodeoxycholicacid，简称CDCA)，是一种天然的胆酸，是1848年首次从鹅胆汁中提取得到的。鹅去氧胆酸具有溶解胆结石的能力和其他药学功能，是治疗胆结石的天然良药，同时又是合成熊去氧胆酸和其他甾体化合物的原料。

由于鹅去氧胆酸是鸡、鸭与鹅等家禽胆汁的主要成分，其可直接从禽类的胆汁中提取而来。但是受技术限制，目前市场上的鹅去氧胆酸产品基本是从鸡胆汁中提取得到的。鹅的饲养数量较少，难以应用其胆汁作提取鹅去氧胆酸的原料。鸭的饲养量巨大，与鸡胆汁的组成成分相比，鸭胆汁的成分较复杂，不能应用从鸡胆汁中提取鹅去氧胆酸的方法提取鸭胆汁中的鹅去氧胆酸。

到目前为止，传统的从鸡、鸭与鹅等的胆汁中提取鹅去氧胆酸工艺包括胆汁皂化、酸化、除醇不溶物、除脂、生成钡盐、脱钡等步骤，工艺过程复杂，收率低，产业化应用困难。或者采用钙盐沉淀法，沉淀速度慢，效率低，且双氧水及活性炭脱色效果也不理想。

发明内容

[要解决的技术问题]

本发明的目的是解决上述现有技术问题，提供一种用鸭胆汁中提取的鸭胆酸合成鹅去氧胆酸的方法。该方法通过从鸭胆汁中提取鸭胆酸粗品，然后将鸭胆酸粗品经甲酯化乙酰化后，利用黄鸣龙还原反应制得鹅去氧胆酸，收率好、纯度高；适于产业化应用。

[技术方案]

为了达到上述的技术效果，本发明采取以下技术方案：

一种用鸭胆汁中提取的鸭胆酸合成鹅去氧胆酸的方法，它包括以下步骤：

Ⅰ，鸭胆酸的提取

取新鲜鸭胆汁，皂化、加盐酸调节pH为2～3酸化后得到黑色膏状物；然后加入甲醇完全溶解黑色膏状物并利用石油醚除油脂后，在70℃以下真空浓缩甲醇层得胆汁酸粗品；接着加入乙腈甲醇混合液溶解胆汁酸粗品，并上硅胶柱吸附，梯度洗脱得到所述鸭胆酸粗品；

Ⅱ，鹅去氧胆酸的合成

将步骤Ⅰ得到的鸭胆酸粗品经甲酯化、乙酰化后得到产物A，再经黄鸣龙还原反应得到所述的鹅去氧胆酸粗品；

将该步骤得到的鹅去氧胆酸粗品经氯仿结晶，得到所述鹅去氧胆酸。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅰ中，所述皂化是按新鲜鸭胆汁与氢氧化钠的质量比为1：0.3～0.4向新鲜鸭胆汁中加入氢氧化钠，然后密封升温至110～125℃，搅拌反应12～14h。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅰ中，所述利用石油醚除油脂过程重复2～3次。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅰ中，所述乙腈甲醇混合溶液是将乙腈和甲醇按体积比72：25混合均匀；所述梯度洗脱是用乙腈和甲醇体积比范围为72：25～60：40的乙腈甲醇混合溶液梯度洗脱。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅰ中，所述梯度洗脱后用薄层色谱法(TLC)点样确认分段收集洗脱液得到鸭胆酸粗品。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅱ中，所述甲酯化是将鸭胆酸粗品加入甲醇溶解后，缓慢加入鸭胆酸粗品质量0.11～0.13倍的质量分数为98％的硫酸，常温下甲酯化反应4～5h；然后加入氢氧化钠至反应液pH为6～8，终止甲酯化反应；过滤去除中和产物硫酸钠，浓缩滤液得到鸭胆酸甲酯化物。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅱ中，所述乙酰化是向所述鸭胆酸甲酯化物中加入醋酸酐后，在135～145℃下乙酰化反应4～5h，反应完全后，在120℃以下真空浓缩得到产物A。

根据本发明更进一步的技术方案，在步骤Ⅱ中，所述黄鸣龙还原反应是向产物A中加入乙二醇、质量分数为85％的水合肼溶液和氢氧化钾，然后加热回流4～5h，得到所述鹅去氧胆酸粗品。

根据本发明更进一步的技术方案，所述产物A、乙二醇、水合肼溶液和氢氧化钾的质量比为1：3：1：5。

在步骤Ⅰ中，胆汁酸粗品经上硅胶柱梯度洗脱的过程中，还会洗脱出鹅去氧胆酸粗品，该部分粗品可通过氯仿结晶得鹅去氧胆酸精品。

下面将详细地说明本发明。

本发明通过皂化、酸化、除脂反应后，利用乙腈甲醇混合溶液将得到的胆汁酸粗品过硅胶柱分离纯化，通过薄层色谱法(TLC)点样确认分段收集洗脱液得到鸭胆酸粗品。由于硅胶柱分离纯化后，得到的鸭胆酸粗品纯度较高，从而保证后续反应得到的鹅去氧胆酸产物的高纯度。在加入石油醚除油脂时，通过虹吸分去石油醚层，可浓缩石油醚层回收石油醚，浓缩物为油脂，丢弃。