[发明专利]一种高荧光强度的重组藻胆蛋白串联体的制备方法有效
| 申请号： | 201510990559.8 | 申请日： | 2015-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN106916839B | 公开（公告）日： | 2021-01-26 |
| 发明（设计）人： | 陈华新;姜鹏;武静;李富超 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C07K19/00 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李颖 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 强度 重组 蛋白 串联 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种高荧光强度的重组藻胆蛋白串联体的制备方法，其特征在于：1)将链霉亲和素基因和别藻蓝蛋白α亚基基因通过linker序列连接起来，在此基础上，再通过linker序列串联一个或多个别藻蓝蛋白α亚基基因，将该融合基因插入到大肠杆菌表达载体pCDFDuet-1的表达框中；将裂合酶基因cpcS插入到pCDFDuet-1的另一个表达框中；
2)将藻红胆素生物合成酶基因Ho1和pebS，分别插入到另一个表达载体pRSFDuet-1的两个表达框中；
3)将上述步骤1)和步骤2)构建的表达载体同时转化大肠杆菌，得到重组大肠杆菌；
4)将重组大肠杆菌进行发酵培养，IPTG诱导融合蛋白表达，通过金属螯合亲和层析纯化，得到共价结合藻红胆素的重组藻胆蛋白单体和串联体；
linker序列是：
GGATCCGCCGGAGCGGAAGCAAAAGGAGCGGAAGCAAAAGGAGCGGAAGCAAAAGGAGCGGAAGCAAAAGCGGAATTC。
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