[发明专利]一种重组酿酒酵母及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 201510961778.3 | 申请日： | 2015-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN105385614B | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 陈启和;李宏吉;董亚晨;牛永武 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N9/02;C12P33/12;C12P33/02;C12R1/865 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈自军 |
| 地址： | 310027 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 酿酒 酵母 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种重组酿酒酵母，其特征在于，命名为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)W303-1b，保藏编号为：CCTCC NO：M 2015662，保藏日期为：2015年11月5日。
2.一种微粒体蛋白在转化白桦脂醇生成白桦脂酸中的应用，其特征在于，所述微粒体蛋白利用如权利要求1所述重组酿酒酵母制备，制备方法包括以下步骤：
(1)接种；
(2)培养，收集菌体细胞；
(3)将菌体细胞破碎；
(4)第一次离心，获得上清液；
(5)将沉淀剂加入上清液，第二次离心获得沉淀，即为所述的微粒体蛋白，
所述第一次离心的条件为：转速4000～8000g，时间5～30min，所述第二次离心的条件为：转速8000～15000g，时间30～120min，
所述沉淀剂为MgCl2、CaCl2或(NH4)2SO4，
所述应用包括以下步骤：
将所述白桦脂醇加入含有所述微粒体蛋白的缓冲体系中，反应完成后，分离纯化得到所述白桦脂酸，
所述反应中白桦脂醇浓度为60～100μmol/L；微粒体蛋白浓度为1～2mg；NADPH浓度为0～2mM。
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