[发明专利]一种热凝胶多糖产生菌株及其应用

权利要求书

1.一种热凝胶多糖产生菌株，其特征在于：所述菌株为根瘤菌(Rhizobium sp.)DH-6，保藏编号为CGMCC No.11547，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；其中所述热凝胶多糖菌株产热凝胶多糖的纯度为88-92％(w/w)，分子量为2.25×10⁶-2.50×10⁶Da，2％(w/v)热凝胶多糖95℃加热10min的凝胶强度是760-900g/cm²。

2.一种如权利要求1所述的热凝胶多糖产生菌株的应用，包括：

将根瘤菌(Rhizobium sp.)DH-6经种子培养和液体深层发酵，得到发酵液，然后分离提纯，干燥，制得热凝胶多糖；

其中种子培养为：在种子培养基中培养，温度为28-30℃，摇床转速180-200rpm，培养时间16-20h；液体深层发酵为：在发酵培养基中发酵，温度为28℃-30℃，接种量3％-10％(v/v),摇床转速200-240rpm，培养时间3d-5d。

3.根据权利要求2所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述种子培养基为：蔗糖20g/L、(NH)₂HPO₄ 3g/L、KH₂PO₄ 1g/L、MgSO₄.7H₂O 0.5g/L、酵母提取物1g/L、CaCO₃ 3g/L，pH＝6.8-7.2。

4.根据权利要求2所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述发酵培养基为：碳源60g/L、(NH)₂HPO₄ 2.3g/L、KH₂PO₄ 1g/L、MgSO₄.7H₂O 0.5g/L、有机氮源1g/L、CaCO₃ 3g/L，pH＝6.8-7.2。

5.根据权利要求4所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述碳源为葡萄糖或/和蔗糖。

6.根据权利要求4所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述有机氮源为酵母提取物和/或玉米浆。

7.根据权利要求2所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述分离提纯具体为：取发酵液于4500-5000rpm离心3-5min，除去上清液，再加水补充至原体积，然后按体积比1:1加入0.6M NaOH溶液，搅拌均匀，静止放置0.5-1h，然后于9000-12000rpm离心5-10min，取上清液，加入0.3M HCl调至最终pH值为中性，再用80目滤布进行过滤，所得的固形物中再加入1-2倍体积的水，再过滤，最后将过滤得到的固形物中加入2-3倍体积的95％乙醇，搅匀后于7000-9000rpm离心5-10min。

8.根据权利要求2所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述干燥温度为50-60℃。

9.根据权利要求2所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：所述热凝胶多糖的分子量为2.25×10⁶-2.50×10⁶Da，纯度为88-92％(w/w)。

10.根据权利要求2所述的一种热凝胶多糖产生菌株的应用，其特征在于：2％(w/v)热凝胶多糖95℃加热10min的凝胶强度是760-900g/cm²。