[发明专利]一种鉴定中华绒螯蟹不同家系所用的引物及其鉴定方法有效
| 申请号： | 201510955048.2 | 申请日： | 2015-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN105385767B | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 沈怀舜;胡亚成;马源潮;周鑫 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 孙昱 |
| 地址： | 214000 江苏省无锡*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴定 中华 绒螯蟹 不同 家系 所用 引物 及其 方法 | ||
本发明公开了一种鉴定中华绒螯蟹不同家系所用的引物及其鉴定方法，包括以下步骤：采集待鉴别的中华绒螯蟹的样本；从中华绒螯蟹腿部肌肉提取DNA；以提取出来的DNA为模板，用10对微卫星引物进行PCR扩增；对PCR产物进行电泳检测，然后进行银染；对银染结果进行数字化分析，用遗传软件测量个体之间的遗传距离，根据遗传距离绘制UPGMA聚类分析图，根据聚类分析结果区分不同家系的个体。本发明可以快速准确的对中华绒螯蟹的家系进行区分，有效防止近亲繁殖，在中华绒螯蟹家系选育和育种中有很大的应用价值。
技术领域:
本发明涉及一种鉴定中华绒螯蟹不同家系所用的引物及其鉴定方法，属于分子标记技术领域。
背景技术:
中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是我国重要的水产经济蟹类，在我国广泛分布于南北沿海和各地湖泊，尤其是长江水系。中华绒螯蟹味道鲜美并且含有大量的维生素A，对儿童的佝偻病和老年人的骨质疏松症有很大的益处。
随着养殖业的快速发展，集约化程度也随着提高，就会产生近亲繁殖和回交的现象，近几年中华绒螯蟹的品质出现了严重退化的现象。在养殖对比试验的过程中，常常将不同的家系放入同一池塘中养殖，最终也需要区分不同的中华绒螯蟹家系，因此建立一种中华绒螯蟹的家系判定方法具有极其重要的理论和生产意义。
发明内容:
本发明的目的是提供一种鉴定中华绒螯蟹不同家系所用的引物及其鉴定方法，有助于快速准确的鉴别不同家系的中华绒螯蟹，有效防止近亲繁殖，在中华绒螯蟹的选育和遗传保护方面提供极大的理论依据。
本发明的技术方案如下：
一种鉴定中华绒螯蟹不同家系所用的引物，该引物包括10对微卫星引物，具体如下：
编号 正向引物DNA序列 反向引物DNA序列 退火温度 1 GATAGACCGTAAATGAGACGGCTG GGACGGAGAAAACTAGAGACCACA 63℃ 2 TAGGGGGTTTTAGGTGTGGTGATA ATTTATGTGGAGGGAATGGGAGAT 62℃ 3 TTTCCCATCATCATGACAACAGTAAT CTCAGGATGGCGATGATGATAA 63℃ 4 TATTTCATCATCACCATCACCACC CATCGAGGCTTTGTTTTGATGTTA 63℃ 5 TTTCAACTTTTCTCCGGGTTGTTA CGGTGATCCTAATTACATTCTGGG 63℃ 6 TATCAGAGAGGAAGAGGACGTTGG GAGGAGGAGGGCAGGTAAAGAG 63℃ 7 ATAACAGATGCAAGTGGAGGTGGT TCTCCCCTCACAAGGACAAAACTA 63℃ 8 CTCAAGGCACCAGGACACTTATCT CACCTCTCCTCTCTAAATCACCCA 63℃ 9 TCCTCGTCATCCTCATCTCTTTTC TCGTGGCTGATTCTCCACTACATA 62℃ 10 AGGGCCTGTGTCCTATGAGTGAT TTCCCTCTGATTATTTCGTTAGGGA 63℃
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