[发明专利]一种松萝中有机酸单体的分离制备方法及应用

权利要求书

1.利用溶剂系统进行松萝中有机酸单体分离制备的方法，其特征在于：包括如下步骤：

将溶剂系统泵入逆流色谱仪中对松萝的有机酸粗提物的样品溶液进行分离，监测洗出液，根据所得的色谱图收集目标组分；所述溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂体系，溶剂系统的上相中加入三氟乙酸作为保留剂，下相中加入氢氧化钠作为洗脱剂；

溶剂系统的上相泵入逆流色谱仪器的分离柱的速度为10-20ml/min，溶剂系统的下相注入逆流色谱仪器的速度为2ml/min，松萝的有机酸粗提物样品溶液注入逆流色谱仪器中时，逆流色谱仪的转速为750-1000rpm；

所述松萝的有机酸粗提物的样品溶液的制备方法，包括如下步骤；采用乙酸乙酯对松萝进行提取，将提取液浓缩、冷冻干燥后，制得松萝的有机酸粗提物，每克有机酸粗提物用5-10ml加入三氟乙酸的上相和5-10ml未加入氢氧化钠的下相的混合物进行溶解，即得。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述溶剂系统中，石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为5:5:(2-3):(8-7)；上相中的三氟乙酸的浓度为10-15mmol/L；下相中的氢氧化钠的浓度为10-20mmol/L。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述溶剂系统中，石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为5:5:3:7。

4.根据权利要求2的方法，其特征在于：所述溶剂系统的制备方法包括如下步骤：将石油醚、乙酸乙酯、甲醇和水按权利要求2中各组分的配比进行混合，摇匀后静置，待分层后，将上下两相分开；在上相中加入三氟乙酸，在下相中加入氢氧化钠。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：前1.5小时内的下相中的氢氧化钠的浓度为10mmol/L，1.5小时以后氢氧化钠的浓度转换为20mmol/L。

6.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征在于：分析有机酸粗提物的高效液相色谱条件为：YMC-Pack ODS-A C₁₈column，250mm×4.6mm，紫外检测波长300nm，柱温：25℃，流速：1.0ml/min，进样量：10μl，流动相采用甲醇-水，梯度洗脱程序为：0-40min，50％-100％甲醇；40-55min，100％-100％甲醇。

7.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征在于：pH区带逆流色谱矩形峰的鉴定方法，采用Agilent 5973N质谱仪和Bruker 400MHz核磁共振波谱仪分别进行MS，¹H-NMR和¹³C-NMR谱的测定。

8.权利要求1-5任一所述的方法在松萝中有机酸单体分离制备中的应用。