[发明专利]一种检测Dubin-Johnson综合症的ABCC2基因的试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 201510925072.1 | 申请日： | 2015-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN105463086A | 公开（公告）日： | 2016-04-06 |
| 发明（设计）人： | 程乐华;邓小净;卢守建;乐亚玲;梁超;王绪华;方国伟;陈忠;黄士昂 | 申请（专利权）人： | 上海新培晶医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人： | 黄志达 |
| 地址： | 200025 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 dubin johnson 综合症 abcc2 基因 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种检测Dubin-Johnson综合症的ABCC2基因的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括PCR扩增反应试剂以及用于样本DNA中ABCC2基因扩增的PCR引物；其中，PCR引物如下：
ABCC2-3F：CCTATCCATCACCGGAAACC；
ABCC2-3R：TGTTTCACCCCATTCCAACC；
ABCC2-7F：TATCGACAAGATCGCAACTCC；
ABCC2-7R：ATCTTCCGCTGGCAATCA；
ABCC2-8F：TGGAACAGTGAAGGCAGC；
ABCC2-8R：CATCTTGAAAACTGCCTGC；
ABCC2-9F：GCTAGATGCGATGGCGTATG；
ABCC2-9R：CCTCAACCTTGGAATCAATGCT；
ABCC2-13F：AGGTGGTGTAGGTCTATAGTGGA；
ABCC2-13R：AGTTTACCAGCAAAAGTTAGACAT；
ABCC2-15F：AGATTTCATTCACCTCCTGTTAG；
ABCC2-15R：GATATTCATGGCCCCATAGTAG；
ABCC2-16F：CAGACTTCATGGAGACTCAGAGA；
ABCC2-16R：GGAGAAGGCACTGAGGGCTA；
ABCC2-17F：AGCATCACACACATTTATCATCTAA；
ABCC2-17R：CCACTTAGTACAAACACATGATTTC；
ABCC2-18F：ACCTCTGCTCTACATTGTCACA；
ABCC2-18R：GTGTAACCAAGAGTCGAGTCTATAA；
ABCC2-23F：TTAGCCCAAGGTATGTCTGATG；
ABCC2-23R：GTCTTCTTCACTAGATGCTGAGCTA；
ABCC2-25F：CGGAGCCTCTCATCATTCTG；
ABCC2-25R：CCTCCCACCGCTAATATCAA；
ABCC2-28F：AAGTCTAGTTCAGCCTATTAAATGC；
ABCC2-28R：CTGCTCTCCACTCTGTCCAAT；
ABCC2-29F：CTTACCTCCTGTGACTGTGAATG；
ABCC2-29R：CCGAGTAGACCGTGGAATTGA；
ABCC2-30F：GAACTCCGAGGTCCTTTTCTG；
ABCC2-30R：AGGAATCAGACCTGGATGAAAAT。
2.根据权利要求1所述的一种检测Dubin-Johnson综合症的ABCC2基因的试剂盒，其特征在于：所述PCR扩增反应试剂包括DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2和反应缓冲液。
3.一种如权利要求1所述的检测Dubin-Johnson综合症的ABCC2基因的试剂盒的检测方法，包括如下步骤：
(1)采集待测血液样本，提取DNA；
(2)以该DNA为模板，采用用于样本DNA中ABCC2基因扩增的PCR引物进行PCR扩增，得到PCR反应产物，进行测序分析，确定是否存在碱基突变。
4.根据权利要求3所述的一种检测Dubin-Johnson综合症的ABCC2基因的试剂盒的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中的PCR反应条件为：95℃5min；95℃30s、62℃30s、72℃40s，15个循环；95℃30s，55℃30s，72℃40s，25个循环；最后72℃10min。
5.根据权利要求3所述的一种检测Dubin-Johnson综合症的ABCC2基因的试剂盒的检测方法，其特征在于：所述步骤(2)中的PCR反应体系为：PCR扩增反应试剂10μL，ddH2O6μL，上下游引物各1μL，样品DNA2μL。
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