[发明专利]一种姜黄组织培养快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种姜黄组织培养快速繁殖方法。

背景技术

药材姜黄又名宝鼎香、黄姜，为姜科植物，姜黄(CurcumalongaL.)的干燥根茎，具有 破血、行气、通经、止痛的功效，用于治疗风湿、肩臂酸痛、胸胁疼痛、痛经以及损伤瘀痛 等。

现代研究表明，姜黄根茎以姜黄素类为主，含有倍半萜类化合物、酸性多糖、挥发油类、 菜油甾醇厚等多种复杂成分，具有保护免疫系统(抗炎、创伤愈合等)、消化系统(抗溃疡、 解痉)、心血管系统(降压、降血脂、抗血凝)和保肝利胆作用，以及兴奋子宫、抗生育、抗 氧化、抗突变、抗肿瘤、抗艾滋病、抗老年痴呆、抗病原微生物及原虫等广泛药理活性，且 无毒副作用。

我国己经开发出多种以姜黄为主要原料的中成药，如：马应龙麝香痔疮膏、舒肝片、珊 瑚癣净等。美国国立肿瘤研究所将姜黄素列为第三代癌化学预防药。除了用于临床中药配方、 作为多种传统中成药和抗菌消炎、抗肿瘤类新药开发的重要原料外，姜黄色素还被广泛用作 食品添加剂、饮料原料、染料添加剂，以及香水等日化用品，出口东南亚和欧美等国家，表 现广阔的开发潜力和市场前景。因此，随着规模开发利用的需求，姜黄的种植面积不断扩大。

植物姜黄主要分布于四川、福建、江西、在广西、湖北、陕西、台湾、云南等地也有栽 培。但是，姜黄开花很少，大多数种子不充实，栽培上主要利用根茎繁殖，称为“种姜”，即 “老母姜”，但不能使用老母姜作种，要待子姜繁殖出的长成后的母姜，即“二母姜”才行， 因此，姜黄和繁殖速度慢、效率低下。迄今尚无姜黄组织培养研究的报道。

发明内容

本发明通过以下技术方案达到上述目的，一种姜黄组织培养快速繁殖方法，包括如下步 骤：

(1)外植体的选择与消毒：取姜黄地下块茎作外为植体，先用2v/v％的洗洁精水溶液 浸泡20min，线状自来水冲洗15-20min，再用添加了2-3滴吐温-20的0.1m/v％的升汞消 毒10-15min，无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸吸去除外植体表面水份，其中，无菌水为 经高温高压灭菌的蒸馏水；

(2)块茎发芽培养和获得无菌试管苗：将步骤(1)中获得的外植体接种到MS发芽培 养基中培养得到无菌试管苗，其中MS发芽培养基中添加IAA0.1-0.5mg/L、6-BA0.5-2.0 mg/L、蔗糖30mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；

(3)试管苗快速繁殖和获得丛生芽：将步骤(2)中得到的试管苗接种至MS丛芽培养 基中培养25-30d，获得丛生芽，其中，MS丛芽培养基中添加ZT0.1-1.0mg/L、IBA0.1-1.0 mg/L、蔗糖30mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；

(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽转接至MS壮苗培养基中培养25-35 d，得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加6-BA0.5-1.5mg/L、NAA0.1-0.5mg/L、蔗糖 30mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；

(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株转接至1/2MS生根培养基中培养25-35d， 得到带根完整植株，其中1/2MS培养基中添加NAA0.1-1.0mg/L、IBA0.1-0.5mg/L、蔗糖15 mg/L、琼脂5mg/L，pH值5.8；

(6)炼苗与移栽：室温下打开组培瓶盖，加入少量自来水，炼苗7天；待培养基表面形 成角质后，取出幼苗，洗净根部培养基，移栽到沙床中；在沙床中生长27-33d，移栽到大田。

本发明突出的优点在于：

(1)通过姜黄组织培养，在短时间内培育出大量适合移栽的姜黄种苗，显著提高姜黄种 苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足市场需求。

在MS发芽诱导培养基中添加6-BA0.5-2.0mg/L，可显著促使芽萌动，添加IAA0.1-0.5 mg/L，可促使芽伸展，从而产生大量丛生芽；在MS壮苗培养基添加NAA0.1-0.5mg/L可促 进丛生芽长高和展叶。

(2)采用本发明培养所得到的组培苗增殖系数达到10-15倍，获得组培苗生根率在98％ 以上，移栽苗床成活率在95％以上，有效解决了姜黄工厂化育苗的问题。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明,