[发明专利]一种融合基因usp45-egl3及其所编码的蛋白和应用

权利要求书

1.一种融合基因usp45-egl3，它包含乳酸乳球菌分泌蛋白基因usp45的基因片段和瑞氏木霉β-1,4-葡聚糖内切酶基因egl3中编码成熟蛋白的核苷酸序列，其核苷酸序列为SEQID No. 1，全长为738 bp。

2.权利要求1所述的融合基因usp45-egl3在表达β-1,4-葡聚糖内切酶中的应用。

3.权利要求1所述的融合基因usp45-egl3所编码的融合蛋白，其氨基酸序列为SEQ IDNo. 2，全长为245个氨基酸。

4.含有权利要求1所述融合基因usp45-egl3的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或转基因重组菌。

5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于为将所述的融合基因usp45-egl3亚克隆至pMG36e原核表达载体中，构建出的重组表达载体pMG36e-usp45-egl3。

6.含权利要求5所述的重组表达载体pMG36e-usp45-egl3的转基因重组菌E. coli DH5α/ pMG36e-usp45-egl3。

7.根据权利要求6所述的转基因重组菌E. coli DH5α/ pMG36e-usp45-egl3，其特征在于其构建流程如下：采用重叠延伸PCR合成技术合成正向带有Sma I，反向带有Xba I 酶切位点的usp45-egl3融合基因；将经Sma I和Xba I双酶切后的usp45-egl3融合基因和同样用这两种酶切好的克隆载体pGHn质粒在DNA连接酶作用下进行连接，获得质粒pGHn-usp45-egl3；将质粒pGHn-usp45-egl3克隆到Top10大肠杆菌并获取阳性克隆，提取阳性克隆的质粒并酶切回收正确的usp45-egl3融合基因，亚克隆至pMG36e原核表达载体中，构建出重组载体pMG36e-usp45-egl3，采用热激法转化至DH5α构建重组大肠杆菌E. coli DH5α/pMG36e-usp45-egl3。

8.权利要求1中所述的融合基因usp45- egl3及权利要求4中所述的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或转基因重组菌在制备β-1,4-葡聚糖内切酶及水解纤维素中的应用。

9.权利要求6或7所述的转基因重组菌E. coli DH5α/ pMG36e-usp45-egl3在分泌表达β-1,4-葡聚糖内切酶蛋白质中的应用。