[发明专利]混合型己酸菌培养液的生产方法

权利要求书

1.一种混合型己酸菌培养液的生产方法，包括如下步骤：

（1）培养基配方如下：1000mL水，乙酸钠8～10g,硫酸镁0.3～0.4g，硫酸铵0.8～1g，酵母膏1.5～2.5g，磷酸氢二钾0.6～0.8g，1.5～2.5g碳酸钙（单独灭菌），20～25mL乙醇（不灭菌单独加入）；

（2）121℃度下，培养基灭菌20分钟；

（3）将己酸菌（CK-j1）接种于培养基中，接种容器为若干250mL三角瓶，碳酸钙、乙醇加入培养基，每个250mL三角瓶需加入15～20mL的己酸菌菌种，接种后需将没有接种的培养基加入到已经接种的三角瓶中，以液面在三角瓶口颈部离三角瓶顶端瓶口4～5cm为宜，接种后采用液体石蜡液封培养，石蜡的使用量为1～1.5mL，接种三瓶，每瓶300～330mL，在33～35℃条件下活化培养5～7天，制得己酸菌种子液，己酸菌浓度为1.5～5.0×10⁸CFU/mL，可以作为一级种子液使用；

（4）按体积5%～8%的比例提取一级种子液，接种于二级己酸菌菌种培养基中，接种容器为若干5L三角瓶，二级己酸菌菌种培养基配方同上述培养基的配方,碳酸钙、乙醇加入培养基，每个5L三角瓶需加入300～400mL的一级种子液，接种后需将没有接种的培养基加入到已经接种的三角瓶中，以液面在三角瓶口颈部离三角瓶顶端瓶口4～7cm为宜，接种后采用液体石蜡液封培养，石蜡的使用量为2～3mL，将接种后的二级己酸菌菌种培养基在33～35℃的条件下培养10～12天，己酸菌浓度为1.5～2.5×10⁸CFU/mL，可以作为二级种子液使用，可进行大规模生产接种；

（5）采用1000L酒缸作为培养容器，酒缸消毒采用酒精消毒方法，使用75%酒精2L,清洗缸体内面反复2次，生产培养基配方如下：40～50斤大曲粉，2～2.5Kg碳酸钙，4～5Kg乙酸钠，350～450Kg酒尾，300～400Kg黄水，80～150Kg三级酒；按体积3%～5%的比例提取二级种子液，接种于生产培养基中；添加顺序为：先加入酒尾和黄水，测定酒度，根据酒度情况添加三级酒，最终保证生产培养基酒度控制在23～28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸钙和乙酸钠，随后使用乙醇灭菌的木棒搅拌，使添加的大曲粉分散，添加的盐类物质溶解，最后加入二级种子液；温度控制在30～35度，培养20～30天时，己酸菌浓度达到5.0～9.0×10⁷CFU/mL时，制作成混合型己酸菌培养液。

2.根据权利要求1所述的混合型己酸菌培养液的应用方法，在浓香型酒醅入池前取15～20Kg混合型己酸菌培养液泼洒于窖池壁；浓香型酒醅入池时，根据酒醅酸度、水分情况取0.5～2Kg培养液泼洒于入窖酒醅中，随着逐层入窖可逐层泼洒。

3.根据权利要求1所述的混合型己酸菌培养液的再生产方法，当1000L培养液剩余400～500L时，可继续补齐培养液，添加配方如下：10～15斤大曲粉，0.5～1.5Kg碳酸钙，1～2Kg乙酸钠，150～250Kg酒尾，150～200Kg黄水，30～100Kg三级酒；添加顺序为：先加入酒尾和黄水，测定酒度，根据酒度情况添加三级酒，最终保证培养基酒度控制在23～28度，然后添加大曲粉，再添加碳酸钙和乙酸钠，随后使用乙醇灭菌的木棒搅拌，使添加的大曲粉分散，使添加的盐类物质溶解，温度控制在30～35度，培养5～7天时，己酸菌浓度达到5.0～9.0×10⁷CFU/mL时，得到混合型己酸菌培养液，可以应用于生产。