[发明专利]一种IdeS蛋白酶、其制备方法及应用有效
| 申请号： | 201510848018.1 | 申请日： | 2015-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN105368808B | 公开（公告）日： | 2019-04-30 |
| 发明（设计）人： | 王征;徐云霞;孙玉华;楼俊文;张丹;成裕 | 申请（专利权）人： | 苏州康聚生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;C12P21/06 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋;侯潇潇 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市苏州工业*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 ides 蛋白酶 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种编码IdeS蛋白酶的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示的片段。
2.一种IdeS蛋白酶的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
(1)通过基因合成技术获得如权利要求1所述的多核苷酸序列，并将所述多核苷酸序列重组到大肠杆菌的pET系列表达载体，构建重组载体；
(2)将重组载体转化到大肠杆菌中，得到含有所述多核苷酸序列的阳性表达菌，对所述阳性表达菌扩大发酵培养，诱导所述IdeS蛋白酶蛋白表达。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述发酵培养的培养温度为30-37℃。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养的溶氧量为20-30％。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养的pH为6.8-7.2。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养中诱导剂加入的时间为发酵培养开始后12-72h。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养中诱导剂加入的时间为发酵培养开始后15-65h。
8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述阳性表达菌经过验证正确后，进行扩大工业化生产IdeS蛋白酶。
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