[发明专利]从银杏叶中提取分离银杏黄酮和银杏内酯的方法

说明书

本发明提供一种从银杏叶中提取分离银杏黄酮和银杏内酯的方法，包括三个步骤：灭酶工艺、提取工艺和柱纯化工艺；本发明将新鲜银杏叶采用碱水蒸煮灭酶，可以将原料鲜银杏叶中的酶迅速灭活，而且采用碱水浸泡可以将原料中的银杏黄酮最大程度地游离出来，将蒸煮后残留的碱水液加入提取有机溶剂中，有利于后续提取完全，提高产品收率。

技术领域

本发明属于黄酮和内酯提取分离领域，涉及一种提取银杏黄酮和银杏内酯的方法，具体涉及一种从银杏叶中提取分离银杏黄酮和银杏内酯的方法。

背景技术

银杏是一种多年生木本植物，又名白果树，公孙树。银杏是目前世界上珍稀裸子植物之一，其生存历史可追溯到2亿年前，树龄达千余年，素有“活化石”之称。银杏叶的化学成分主要有黄酮类、萜类、酚类、25种有效元素及17种氨基酸等。

银杏叶中的黄酮甙类化合物由槲皮素、山奈酚、异鼠李素、杨梅皮素、木犀草素和洋芹素的单、双、三葡萄糖甙组成，其中后三种物质所占比例很小，测定出前三种主要成分的含量即可基本反映出黄酮类化合物的含量高低。银杏叶黄酮具有扩张血管、抑制血小板活化因子、抗氧化、调血脂和抗肿瘤等药理作用，对治疗心绞痛、心肌梗塞等有特殊疗效，黄酮醇甙还是一种过氧化自由基的清除剂，能消除对心、脑血管内皮细胞有毒害作用的自由基，具有抗衰老、防癌等保健作用。

银杏内酯主要包括二萜内酯和倍半萜内酯。二萜内酯有5种，即银杏内酯(ginkgolides)A、B、C、M和J，简称GA、GB、GC、GM、GJ；倍半萜内酯有1种，即白果内酯(bilobalide)，简称BB。银杏内酯具有专属性的抗血小板活化因子(platelet activatingfactor，PAF)活性，是天然的PAF拮抗剂，可治疗气喘、肺过敏、心力衰竭等疾病，其中尤以GB的活性最高，白果内酯为神经精神病药物，能抗神经末梢的衰老，为真正的抗衰老物质。

对于银杏黄酮和银杏内酯提取分离的专利文献很多，方法均有差异。大部分选择水提醇沉或醇提水沉，继而采用大孔树脂进行柱层析，该法所得产品含量偏低，而且普遍收率偏低。本发明致力找出一条操作简单、快速的工艺路线，提高产品质量和有效成分回收率。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供一种有效成分收率较高的从银杏叶中提取分离银杏黄酮和银杏内酯的方法。

解决上述问题的技术方案：所提供的从银杏叶中提取分离银杏黄酮和银杏内酯的方法，包括以下步骤：

步骤1灭酶工艺

将碱水加入密闭容器中加热至沸腾，然后加入银杏叶蒸煮灭酶，得到处理后的银杏叶；所述碱水为碳酸氢钠溶液或氨水；

步骤2提取工艺

将步骤1所得的银杏叶用乙醇溶液提取，将提取渣再用乙醇溶液提取，合并提取液浓缩处理，调至中性，放置产生沉淀，取上清液备用；

步骤3柱纯化工艺

向步骤2所得上清液中加入聚酰胺，搅拌均匀，烘干，另取聚酰胺和氧化铝混合填料装柱，采用石油醚和乙酸乙酯混合溶剂淋洗，将烘干的产物加入柱顶部，继续采用石油醚和乙酸乙酯混合溶剂洗脱，点板观测，分段收集有效成分，将含有有效成分的洗脱段浓缩，得到银杏内酯；待内酯洗脱完毕后，用乙酸乙酯和乙醇混合溶剂洗脱，点板观测，分段收集有效成分，将含有有效成分的洗脱段浓缩，得到银杏黄酮。

在提取工艺中是将步骤1所得的银杏叶用质量浓度为90％的乙醇溶液提取，将提取渣再用质量浓度为80％的乙醇溶液提取合并提取液浓缩处理，调至中性，放置产生沉淀，取上清液备用。

为述步骤1具体是：将碱水加入密闭容器中加热至沸腾，然后加入银杏叶蒸煮灭酶5-30min，得到处理后的银杏叶；所述银杏叶与碱水的质量比为1：5；所述银杏叶和碱水中碱的质量比为1：0.05-0.3。

上述碱水为碳酸氢钠溶液。