[发明专利]一种含重组乙肝表面抗原的纳米颗粒疫苗制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种含重组乙肝表面抗原的纳米颗粒疫苗制剂，其特征在于组成为：以稳定性保护剂人血清白蛋白、重组乙肝表面抗原和释放促进剂碳酸氢钠组成内核，由高分子材料聚乳酸-聚羟基乙酸嵌段共聚物作为包封层将内核包裹其中，最外层包覆有壳聚糖或甘露聚糖或它们的混合物；

其中，重组乙肝表面抗原与血清白蛋白的质量比为1∶5；

制备过程中，重组乙肝表面抗原、人血清白蛋白和碳酸氢钠与含有聚乙烯醇的磷酸盐缓冲溶液混合得到内水相，内水相中碳酸氢钠的浓度为1.25 mg/ml～5 mg/ml。

2.根据权利要求1所述的疫苗制剂，其特征在于：重组乙肝表面抗原为酵母乙型肝炎表面抗原或中国仓鼠卵巢细胞分泌的乙型肝炎表面抗原。

3.根据权利要求1所述的疫苗制剂，其特征在于：聚乳酸-聚羟基乙酸嵌段共聚物分子量为9.0×10³～8.7×10⁴，其中聚乳酸与聚羟基乙酸的质量比为（50:50）～（85:15）。

4.根据权利要求1所述的疫苗制剂，其特征在于壳聚糖分子量低于5000 Da，甘露聚糖为从酿酒酵母提取的细胞壁多糖，分子量35000–60000 Da。

5.一种如权利要求1所述的含重组乙肝表面抗原的纳米颗粒疫苗制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1）将重组乙肝表面抗原、人血清白蛋白和碳酸氢钠加入到含有聚乙烯醇的磷酸盐缓冲溶液中,混合得到内水相；

（2）将聚乳酸-聚羟基乙酸嵌段共聚物溶于有机溶剂中制成油相，取步骤（1）所得内水相加入油相中,高速搅拌形成W/O初乳液；

（3）将W/O初乳液加入含有聚乙烯醇的外水相溶液中，高速搅拌形成W/O/W复乳液，再低速搅拌6～8小时，离心洗涤，收集纳米颗粒，真空冷冻干燥，得到含重组乙肝表面抗原的纳米颗粒疫苗制剂成品。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于内水相乳化剂聚乙烯醇浓度为5 mg/ml～20 mg/ml。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤（2），内水相与油相的体积比为1:（2～4）。

8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤（2），搅拌转速为15000转/分钟，搅拌时间为30～300秒，步骤（3），搅拌乳化的转速为12000转/分，搅拌时间为10～20分钟。

9.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：有机溶剂为二氯甲烷或二氯甲烷和丙酮的混合液，有机溶剂为二氯甲烷和丙酮的混合液时，二氯甲烷与丙酮的体积比为75:25。

10.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，油相中聚乳酸-聚羟基乙酸嵌段共聚物的浓度为50～100 mg/ml，外水相分散介质聚乙烯醇的浓度为5 mg/ml～50 mg/ml，外水相中壳聚糖的浓度为20 mg/ml，外水相中甘露聚糖的浓度为10 µg/ml。