[发明专利]从狭叶金粟兰中分离纯化的一对苯基不饱和三元醇异构体化合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种从狭叶金粟兰中分离纯化的一对苯基不饱和三元醇旋光异构体化合物，同时还涉及该两种化合物的制备方法，以及其在抑制单纯疱疹病毒2型(HSV-2)中的应用。

背景技术

金粟兰科植物在我国分布有3个属16个种，10种为我国特有植物，其中狭叶金粟兰(Chloranthusangustifolius)即为该科植物金粟兰属(Chloranthus)我国特有种。该科植物大部分均可做药用，多具有抗菌消炎，散瘀活血的功效。现代药理活性研究表明该科植物多具有抗肿瘤、抗菌、增强免疫、抗病毒、抗溃疡、镇痛、抗血小板集聚、收缩子宫等活性。目前从金粟兰科植物中共分离得到化合物约200个，类型包括萜类及聚合物、黄酮及黄酮苷、香豆素、酰胺、有机酸、甾体及甾体皂苷等。然而，已有所涉抗病毒研究均集中于对该科植物中特征性成分(倍半萜聚合物)的抗HIV病毒、乙肝病毒和流感病毒的研究。

疱疹病毒主要侵犯外胚层来源的组织，包括皮肤、粘膜和神经组织。感染部位和引起的疾病多种多样，并有潜伏感染的趋向，严重威胁人类健康。其中单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是生殖器疱疹的主要病原，一旦感染，患者将终身携带这种病毒并周期性地出现生殖器疱疹性损伤，HSV-2感染还会增加HIV-1传播的风险，且目前没有针对HSV-2的有效疫苗问世。在抗疱疹病毒药物治疗中，阿昔洛韦(ACV)是目前公认的首选药物，同时许多中医药汤剂、酊剂也有治疗作用。最近研究表明：中成药金粟兰搽剂和金粟兰酊剂外敷配合红外线照射治疗带状疱疹，能减轻疼痛，促进疱疹吸收，缩短病程(中国中医急症2014，23(7)：1335-1336；湖北科技学院学报(医学版)2015，29(2)：128-129)。然而，金粟兰中起抗疱疹病毒的活性成分基础国内外尚无研究报道。

本发明在对我国特有植物狭叶金粟兰进行化学成分分离鉴定及活性筛选研究中发现，该植物所含的一对苯基不饱和三元醇的旋光异构体具有良好的抗HSV-2病毒活性。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对上述现有技术的不足，提供一种一对苯基不饱和三元醇的旋光异构体，同时提供从狭叶金粟兰中分离纯化的该对苯基不饱和三元醇的旋光异构体的方法，以及该两种化合物在抗单纯疱疹病毒2型(HSV-2)中的应用。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：具有下述式(1)和式(2)所示的一对旋光异构体化合物，

其中，式(1)：(–)5-对甲氧基苯基-4(E)-烯-1,2,3-三羟基戊烷的旋光值为负；式(2)：(+)5-对甲氧基苯基-4(E)-烯-1,2,3-三羟基戊烷的旋光值为正。

本发明同时提供上述异构体化合物的制备方法，步骤如下：

A.取狭叶金粟兰地上部分洗净、风干、粉碎，按1g狭叶金粟兰粉加5-10ml95％体积浓度的乙醇的比例，于狭叶金粟兰粉中加入乙醇在室温下浸提3次，每次浸提3-7天，过滤，合并滤液，减压浓缩回收乙醇后，得到膏状乙醇浸提物；其中，狭叶金粟兰粉的粒度≤20目。

B.按1g乙醇浸提物加40-80ml水的比例，将乙醇浸提物加水分散后，常温下，先用等体积的石油醚萃取3次以去除色素，每次萃取3-5小时，再用等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次萃取3-5小时，合并乙酸乙酯萃取层，减压回收乙酸乙酯，干燥，得乙酸乙酯浸膏；其中，石油醚和乙酸乙酯皆为分析纯；

C.将乙酸乙酯浸膏用小孔吸附树脂去除色素，并将收集到的洗脱液浓缩，得浓缩物；

其中，将乙酸乙酯浸膏用小孔吸附树脂除去色素是将乙酸乙酯浸膏用甲醇溶解为饱和溶液后经小孔吸附树脂吸附至饱和，先用水洗脱至无色，再用85％体积浓度的甲醇洗脱4-8个柱体积，收集洗脱液；其中，甲醇为分析纯。

上述小孔吸附树脂只要是能用于去除乙酸乙酯膏色素的皆可，如MCIGELCHP20P37-75um或SMBMCIGEL50-70um等。

D、将浓缩物用C-18ODS反相色谱柱进行层析分离，以体积比为3:7→7:3的甲醇与水的混合液进行梯度洗脱，收集甲醇与水的体积比为4:6时的洗脱液，经薄层色谱检测，合并在UV254nm下的紫外显色组分；其中，甲醇为分析纯。

E.将该组分用葡聚糖凝胶柱(SephadexLH-20)柱层析进行分离纯化，经薄层色谱检测，合并主点馏分并减压浓缩，得淡黄色膏状物；其中，采用葡聚糖凝胶柱柱层析分离纯化时的洗脱剂为甲醇，该甲醇为分析纯。