[发明专利]一种鉴定多花黄精的方法及其专用引物对有效
申请号: | 201510817723.5 | 申请日: | 2015-11-23 |
公开(公告)号: | CN105274245B | 公开(公告)日: | 2018-06-19 |
发明(设计)人: | 黄璐琦;袁媛;季鹏章;赵玉洋 | 申请(专利权)人: | 中国中医科学院中药研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100700 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多花黄精 引物 待测样品 专用引物 种鉴定 扩增 单链DNA分子 核苷酸序列 基因组DNA 临床用药 应用 安全 | ||
本发明公开了一种鉴定多花黄精的方法及其专用引物对。本发明所提供的引物对,由引物DH‑1F和引物DH‑2R组成,引物DH‑1F和引物DH‑2R均为单链DNA分子,核苷酸序列依次为序列表中的序列1和序列2。利用引物DH‑1F和引物DH‑2R对待测样品的基因组DNA进行PCR扩增,如果能够实现有效扩增,则所述待测样品中含有或候选含有多花黄精;如果不能实现有效扩增,则所述待测样品中不含有或候选不含有多花黄精。实验证明,利用本发明提供的鉴定多花黄精的方法能够快捷而简便的鉴定多花黄精,以保障多花黄精临床用药的安全,具有重大的推广前景和应用价值。
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鉴定多花黄精的方法及其专用引物对。
背景技术
多花黄精(Polygonatum cyrtonema)是百合科黄精属的植物,是中国的特有植物,作为常用补益药,其药用历史已达2000余年之久,多花黄精主产于四川、贵州、湖南、湖北等地生长于海拔500米至2100米的地区,一般生于灌丛、林下和山坡阴处其味甘性平,入肺、脾、肾三经,有补气润肺、养阴、健脾益肾的功效。临床上用于脾胃气虚,营养不良、肺虚燥咳,精血不足等症。
2010年版《中国药典(一部)》规定作为黄精药用的有3种基源植物,分别为黄精(Polygonatum sibiricum Red)、多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)和滇黄精(Polygonatum ingianum Coll.et Hemsl.)。为保证用药安全,人们使用过多种方法对多花黄精进行真实性鉴定,然而多花黄精及其伪品的形态和化学成分高度相似,且传统形态学和化学鉴别常受到人为或环境因素的影响。但目前已报导的多花黄精的分子鉴别方法往往表现为重现性差、操作复杂、周期长等缺陷,不能满足实际需要,因此迫切需要建立快捷而简便的真伪品鉴定方法,以保障多花黄精临床用药的安全。
发明内容
本发明所要解决的技术问题如何快速、简便的鉴定多花黄精。
为解决上述问题,本发明首先提供了一种用于鉴定多花黄精的引物对。
本发明所提供的用于鉴定多花黄精的引物对,可由引物DH-1F和引物DH-2R组成,所述引物DH-1F和所述引物DH-2R均为单链DNA分子,核苷酸序列依次为序列表中的序列1和序列2。
上述用于鉴定多花黄精的引物对中,所述引物DH-1F和所述引物DH-2R的摩尔比可为1:1。
上述用于鉴定多花黄精的引物对的应用,可为如下a1)-a6)中任一种:
a1)制备用于检测或辅助检测多花黄精的试剂盒;
a2)检测或辅助检测待测样品中是否含有或候选含有多花黄精;
a3)制备用于鉴定或辅助鉴定多花黄精的试剂盒;
a4)鉴定或辅助鉴定待测样品是否为或候选为多花黄精;
a5)制备用于鉴定或辅助鉴定市售多花黄精的真伪性的试剂盒;
a6)鉴定或辅助鉴定市售多花黄精的真伪性。
本发明还提供了用于鉴定多花黄精的试剂盒。
本发明所提供的用于鉴定多花黄精的试剂盒含有上述用于鉴定多花黄精的引物对。
本发明还保护上述用于鉴定多花黄精的试剂盒的制备方法,可包括将上述用于鉴定多花黄精的引物对的各引物分别单独包装的步骤。
上述用于鉴定多花黄精的试剂盒的应用也属于本发明的保护范围。上述用于鉴定多花黄精的试剂盒的应用可为如下b1)或b2)或b3):
b1)检测或辅助检测待测样品中是否含有或候选含有多花黄精;
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