[发明专利]一种改造尿素代谢调控途径降低酿酒酵母尿素积累的方法在审
| 申请号： | 201510816366.0 | 申请日： | 2015-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN105274133A | 公开（公告）日： | 2016-01-27 |
| 发明（设计）人： | 周景文;陈坚;堵国成;吕永坤;赵鑫锐 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;C12R1/865 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改造 尿素 代谢 调控 途径 降低 酿酒 酵母 积累 方法 | ||
1.一种降低酵母尿素积累的方法，其特征在于，所述方法是对尿素代谢途径调控因子Dal81p和Dal82p进行改造。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述改造是同时过量表达调控因子Dal82p和消除了泛素化调控位点的Dal81p。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述消除了泛素化调控位点的Dal81p是指将氨基酸序列为SEQIDNO.1的Dal81p的第69位、918位的氨基酸突变成丙氨酸。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Dal82p的氨基酸序列是SEQIDNO.2所示的序列。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具体是：将氨基酸序列为SEQIDNO.1的Dal81p的第69位、918位的氨基酸突变成丙氨酸得到Dal81pK69A,K918A，再将Dal82pDal81pK69A,K918A和氨基酸序列为SEQIDNO.2的Dal82p先后连接到表达载体pY26-GPD-TEF上，构建得到重组载体pY26-Dal81pK69A,K918A-Dal82p，并将重组载体转化到酵母中表达。
6.根据权利要求1-5任一所述的方法，其特征在于，所述酵母是酿酒酵母。
7.一种尿素积累能力降低的酵母，其特征在于，所述酵母过表达调控因子Dal82p和消除了泛素化位点的Dal81p。
8.根据权利要求7所述的酵母，其特征在于，所述酵母的构建方法是：(1)将氨基酸序列为SEQIDNO.1的Dal81p的第69位、918位的氨基酸突变成丙氨酸得到Dal81pK69A,K918A；(2)将Dal82pDal81pK69A,K918A和氨基酸序列为SEQIDNO.2的Dal82p先后连接到表达载体pY26-GPD-TEF上，构建得到重组载体pY26-Dal81pK69A,K918A-Dal82p；(3)将重组载体转化到酵母中表达。
9.根据权利要求7或8所述的酵母，其特征在于，所述酵母是酿酒酵母。
10.权利要求7所述酵母在食品方面的应用。
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