[发明专利]一种提高红霉素发酵效价的方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物发酵领域，特别是涉及一种提高红霉素发酵效价的方法。

背景技术

红霉素是大环内酯类抗生素，抗菌谱与青霉素相似，临床上常用于对青霉素过敏者的治疗。近年来由于红霉素衍生物的广泛开发使用，使红霉素的需求量不断增加。

现有技术中，以红色糖多胞菌做出发菌株发酵生产红霉素的过程中，全程补入含大量迟效氮源、磷元素的混合氮源和糖水，这种方法具有以下技术缺点：1)随着菌丝体大量繁殖，中后期体积增加，造成溶氧的缺乏；2)由于迟效氮源消耗慢，发酵结束残留较大，影响提取的效果及成品质量；3)有些菌种全程只需补入糖水，只在基础料中加入足够量的氮源，这样会造成前期营养丰富，菌丝大量繁殖，氮源消耗量大，发酵液粘度、发酵液表面张力加大，氧的传递效率降低，溶解氧浓度降低，造成菌体溶氧缺乏，中后期氮源缺乏，菌丝提前衰老，发酵周期缩短，产率减低。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种有效提高红霉素效价的方法。

为实现上述发明目的所采取的技术方案为：

一种提高红霉素发酵效价的方法，其特征是：在以红色糖多胞菌做出发菌株发酵生产红霉素的过程中，缓慢流加补入硫酸铵溶液。

所述硫酸铵溶液的补入量合计为发酵液体积的5-10％。

所述硫酸铵溶液质量体积浓度为2-5％。

所述硫酸铵溶液质量体积浓度为2-3％。

在发酵到60小时时，开始缓慢流加硫酸铵溶液。

在发酵80-140小时缓慢流加硫酸铵溶液。

本发明通过在发酵60小时时开始流加硫酸铵溶液，由于此时期菌丝大量繁殖，基础料氮源利用较多，发酵液需氧量大，发酵液粘度大，体积增加，可通过缓慢流加硫酸铵溶液，改变发酵液粘度，改善溶氧，调节红霉素各组分的合成，同时可补充氮源，增加菌体活力，延长红霉素分泌期，从而提高红霉素发酵水平。

具体实施方式

本发明通过以下实施例进一步详述，但本实施例所叙述的技术内容是说明性的，而不是限定性的，不应依此来局限本发明的保护范围，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

下述实施例中

试验罐全程可检测到溶氧、PH、温度、搅拌转速等参数。

硫酸铵的流加量根据检测粘度及溶氧状况确定。

其它补料按正常工艺控制进行。

制备方法：采用三级发酵生产红霉素，具体步骤如下：

1、斜面孢子制备：将红色糖多胞菌在无菌条件下接种于固体培养基上，35℃恒温培养6-8天，接种于一级种子培养基中。

2、上述斜面孢子培养基按照常规方法配制，配方为：淀粉8g/L,硫酸铵2.5g/L,氯化钠2.3g/L，碳酸钙2.4g/L,玉米浆1.0g/L。

3、一级种子培养：将步骤1生长好的斜面孢子无菌方式接种于一级种子培养基中，35℃恒温培养，通气比为1.5-2.0v/v/min,搅拌转速为400-600r/min,培养40-60小时。

4、上述一级种子培养基用常规方法制备，其配方为淀粉100g/L，糊精50g/L，豆粉75g/L，玉米浆40g/L，硫酸铵18g/L，氯化钠15g/L，碳酸钙35g/L，豆油20g/L。

5、二级种子培养：将步骤3生长好的一级种子培养液无菌方式接种于二级种子培养基中，35℃恒温培养，通气比为1.5-2.0v/v/min,搅拌转速为400-600r/min,培养22-35小时。

6、上述二级种子培养基用常规方法制备，其配方为淀粉300g/L，糊精200g/L，豆粉350g/L，玉米浆120g/L，硫酸铵20g/L，氯化钠25g/L，碳酸钙50g/L，豆油30g/L。

7、发酵培养：将步骤5培养好的二级种子无菌条件分别接种于实施例与对照例发酵培养基中，接种量为10-20％，控制培养温度32-35℃,过程通气比：0.8-1.5v/min,保证过程溶氧不低于20％，培养6-8天。

8、发酵培养基用常规方法制备。

对照例培养基配方为：淀粉580g/L，糊精150g/L，豆粉525g/L，玉米浆300g/L，硫酸铵40g/L，氯化钠37.5g/L，碳酸钙105g/L，豆油50g/L。

实施例发酵培养基配方：淀粉580g/L，糊精150g/L，豆粉375g/L，玉米浆125g/L，硫酸铵40g/L，氯化钠37.5g/L，碳酸钙105g/L，豆油45g/L。