[发明专利]一种便携家庭式梅毒快速检测试纸条

说明书

技术领域

本发明属于医学检测领域，尤其涉及一种便携家庭式梅毒快速检测试纸条。

背景技术

目前，体外培养梅毒病原体仍然没有实现。因此，临床上和实验室对于梅毒的诊断主要集中在血清学特征的检测。虽然也可以通过直接确定病原体进行诊断，但是现有的技术主要是利用暗视野显微镜对样品直接观察，这样的操作具有较强的主观性，即使非常有经验的检测者，也可能会出现假阴性结果；PCR方法也可直接测定病原体的存在，但是该方法的费用昂贵，不易作为血站和医院的常规检测。由此可见，梅毒患者血清学检测在梅毒诊断方面至关重要。血清学诊断包括特异和非特异两种方法，二者之间存在区别。非特异性梅毒诊断方法主要有VDRL、USR、RPR和TRUST等试验，它们具有相同的抗原成分，即一种由美国Pangborn等发现的性病研究实验室抗原(VDRL)，从牛心肌中提取的心拟脂，适量加入胆固醇及卵磷脂以提高敏感性，通常称这种抗原为心拟脂抗原，可有效诊断神经梅毒。但该类方法的特异性受生物学假阳性反应和某些生理性反应的影响，即该方法的灵敏度依赖于病程所处阶段。因此，非特异性梅毒诊断方法只能有限用于常规筛查。特异性梅毒抗体检测方法有FTA-ABS法(FluorescentTreponemalAntibodyAbsorption，梅毒荧光抗体吸附法)、TPHA法(TreponemaPallidumHemagglutinationAssay)、TPPA法(TreponemaPallidumParticleAgglutinationAssay),、SyphilisG/SyphilisM法等。特异性方法常用于非特异性方法阳性样本的确认，TPHA/TPPA法也常用于初筛结果的确证。特异性抗梅毒抗体与疾病的进程没有相关性，即使经过治疗也能终身携带。在特异性梅毒抗体检测方法中，FTA-ABS具有高敏感性，尤其针对早期梅毒，但在HIV感染、自身免疫疾病和怀孕的时候会发生一定比例的假阳性结果(0.35％)。FTA-ABS法对各阶段的梅毒都敏感，但评价具有主观性，有时较困难且复杂，不适合用于初步筛查，仅适用于确证。其他几种特异性梅毒抗体检测方法也具有同样的问题，由于传统的梅毒诊断方法比较繁琐，耗时较长，不易推广。

申请号为02137626.3的专利公开了一种用于诊断梅毒螺旋体感染的梅毒螺旋体抗体酶标诊断试剂。它包括用合成肽抗原或基因工程表达的抗原：P15、P17、P47抗原0.1～10μg/ml包被在酶标板上、酶标二抗(IgG、IgM)：含1∶20～1∶100K酶标二抗稀释溶液和显色剂组合及增溶剂，所述的显色剂组合中的显色剂是TMB丙磺酸钠。显色剂组合可包括TMB丙磺酸钠与过氧化氢异丙苯或其衍生物的组合或TMB丙磺酸钠与羟基脲的组合。这种梅毒螺旋体抗体酶标诊断试剂，在应用合成肽抗原、基因工程表达的抗原基础上，使用了一种水溶性极好、性能稳定的TMB盐类，配合适量的增溶剂、稳定剂，使梅毒螺旋体抗体酶标诊断试剂获得了更好的稳定性能。其高特异性、高灵敏度、操作简便、试剂稳定，使得梅毒检测能自动化、血源批量筛选、规范化管理得到了保证。

上述方法的缺点是主要以酶联免疫反应为主要原理对样品进行检测，需要酶标仪，孵育温箱等大型仪器，不适合家庭使用。且操作复杂，耗时较长，不利于快速的初筛检测。

申请号为201010215044.8的专利公开了一种基于流式微球载体技术的梅毒螺旋体(TP)抗体检验试剂盒及其制备和检测方法，属于免疫分析医学诊断技术领域。具体包括用TP重组抗原包被高聚分子微球，用牛血清白蛋白封闭空白结合点，制成特异性TP探针－高聚分子微球；与待测标本共培养捕获TP抗体，洗涤离心除去未结合的TP抗体，再加入荧光标记的抗人IgG或IgM抗体；使用流式细胞仪检测微球的荧光强度，对受测抗体进行定性或定量分析。本方法具有灵敏度高、特异性强、稳定性好的优点，并可对标本进行微量、多价分析。

上述方法的缺点是需要使用流式细胞仪这种昂贵大型仪器，该仪器在血站和基层医院的配置较少，且该仪器的保养维护成本较高，不适用推广，且无法进行家庭使用和检测。

发明内容

本发明的目的在于提供一种便携家庭式梅毒快速检测试纸条，旨在解决传统的梅毒诊断方法比较繁琐，耗时较长，费用高，不易推广的问题。

本发明是这样实现的，一种便携家庭式梅毒快速检测试纸条包括样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸附垫，梅毒抗原作为捕获抗原被固定到硝酸纤维素膜上，胶体金标记试剂吸附在结合垫上。

进一步，以梅毒抗原TP17和TP47构建大肠杆菌表达载体，梅毒抗原的表达、纯化和鉴定方法为：