[发明专利]检测大麻醇的电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种检测大麻醇的电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用。所述传感器以壳聚糖为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶固定于电极表面，所述纳米金吸附有抗大麻醇抗体。所述制备方法包括步骤：(1)对电极进行预处理，然后在电极上包被壳聚糖溶液；(2)以壳聚糖为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶包被在电极上；(3)继续在电极上包被抗大麻醇抗体；(4)封闭液封闭后即得。本发明的电化学纳米免疫传感器不受样品的浊度、颜色的影响，无需对样品进行纯化、富集等预处理，操作简单，检测灵敏度高、特异性强，能够用于对大麻醇进行快速定量检测，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物免疫检测技术领域，具体涉及一种检测大麻醇的电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用。

背景技术

大麻醇(Cannabinoid)是大麻(marijuana)中影响精神状态的主要成分，它对大脑的作用主要是通过激活一个叫CB1的分子受体来实现的。目前大麻醇主要用于其它药物疗效不佳的某些疾病，如神经系统疾病中的多发性硬化症(MS)、运动性神经疾病、慢性顽固性疼痛和药源性呕吐。另外，该药对青光眼、哮喘和心血管疾病也可能有一定作用，虽然尚未进入临床应用，但已引起研究者的广泛兴趣。对大麻醇的检测方法目前只能达到定性目的，如采用相应的试纸条/板/盒，灵敏度为50ng/mL。为了便于对大麻醇进行研究和应用，亟需研究发展检测灵敏度更高的检测方法。

发明内容

本发明的目的是针对目前无法对大麻醇进行定量检测、检测灵敏度很低的缺陷，而提供一种检测大麻醇的电化学纳米免疫传感器及其制备方法和应用。本发明的电化学纳米免疫传感器不受样品的浊度、颜色的影响，无需对样品进行纯化、富集等预处理，操作简单，检测灵敏度高、特异性强，能够用于对大麻醇进行快速定量检测。

本发明提供下述技术方案解决上述技术问题。

本发明提供的技术方案之一是：一种检测大麻醇的电化学纳米免疫传感器，所述传感器以壳聚糖为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶固定于电极表面，所述纳米金吸附有抗大麻醇抗体。

所述抗大麻醇抗体为本领域常规，其来源和类型均没有特殊要求，既可以是单克隆抗体，也可以是多克隆抗体，优选单克隆抗体。

所述电极可以是本领域常规所述的各类电极，优选玻碳电极。

本发明提供的技术方案之二是：前述电化学纳米免疫传感器的制备方法，其包括如下步骤：

(1)对电极进行预处理，然后在电极上包被壳聚糖溶液；

(2)以壳聚糖为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶包被在电极上；

(3)继续在电极上包被抗大麻醇抗体；

(4)封闭液封闭后即得。

步骤(1)为对电极进行预处理，然后在电极上包被壳聚糖溶液。

其中，所述电极可以是本领域常规所述的各类电极，优选玻碳电极。

所述壳聚糖溶液优选以如下方法制得：将壳聚糖溶于醋酸溶液得到壳聚糖溶液，备用。更优选地，将2g壳聚糖溶于100mL体积百分比为2％的醋酸溶液中，搅拌3h得到2％的壳聚糖溶液，备用。

步骤(2)为以壳聚糖为桥联剂将纳米金和辣根过氧化物酶包被在电极上。

如本领域常规，所述包被为将电极置于溶液中进行包被。优选地，所述包被为将电极置于由纳米金溶液和辣根过氧化物酶溶液组成的混合溶液中进行包被。

所述纳米金溶液优选以如下方法制得：取0.01g/100mL氯金酸溶液100mL，加入1g/100mL的柠檬酸钠溶液4mL混匀，置于微波炉中低火保持8-10min，待自然冷却后用超纯水补充至104mL，即得纳米金溶胶，置于4℃避光保存备用。