[发明专利]一种花生粕醒酒肽的制备方法

说明书

本发明提供一种花生粕醒酒肽的制备方法，步骤包括：以脱脂后的花生粕为原料，经浸提和水洗后，除去水溶性蛋白，所得沉淀加水和Amano SD‑AY10蛋白酶酶解，灭酶后再加入Alcalase AF蛋白酶酶解，灭酶、离心、微滤和超滤，制得具有醒酒作用的分子量在1000～3000Da的花生粕多肽。体外试验表明，该多肽溶液对乙醇脱氢酶具有较高的激活率。动物试验表明，该多肽摄入量为200～400mg/kg·bw时，有显著的防醉和醒酒作用，可开发为醒酒保肝类保健食品。

技术领域

本发明涉及花生多肽制备技术，特别涉及花生粕制备活性多肽的方法，具体是一种利用花生粕制备具有防醉与醒酒作用多肽的方法。

背景技术

花生粕作为花生油生产的副产物，其蛋白质含量达40％～50％，此外还富含黄酮类、鞣质、糖类、三萜或甾体类化合物等活性物质。目前关于花生粕的利用主要集中在分离蛋白的提取和研究，用花生粕制备醒酒多肽的研究较少。医学证明，长期过量饮酒或一次性大量饮酒会对人体十分不利，损害肝、胃、脾等内脏器官，造成胃溃疡、肝硬化等疾病。人们已经开始认识到了解酒保健的重要性。目前市场上的解酒保健品多以中草药提取物主，关于蛋白水解醒酒多肽的报道多见于玉米肽。

关于玉米醒酒肽的研究文献主要有：《酶膜耦合连续法制备玉米肽解酒及防醉研究》(食品科学2012,33(17):241～245)，通过Alcalase碱性蛋白酶耦合膜分离制备出分子量小于5000Da玉米醒酒多肽。CN201010540622的专利《一种醒酒肽的提取方法》，研究以玉米黄粉为原料，经过配水、加酒精和亚硫酸钠升温蒸煮，加碱性蛋白酶风味蛋白酶酶解，过滤后滤液经干燥后即获醒酒肽。CN200910073036的专利《玉米醒酒肽的制备方法》，通过Alcalase碱性蛋白酶和Protamex复合蛋白酶复合水解玉米粉或玉米蛋白制备出一种具有醒酒作用的多肽。以上文献所述中的醒酒肽所用原料均为玉米粉或玉米蛋白。

在《花生粕蛋白醒酒肽饮料的研制》(食品工业,2008,2:45～47)中，采用碱溶酸沉法从花生粕中提取分离蛋白，然后用枯草杆菌碱性蛋白酶酶解花生分离蛋白，制成具有醒酒作用的蛋白饮料。该文献采用碱溶酸沉法提取分离蛋白，如实现工业化生产可能会带来环境污染问题；所得酶解多肽未进一步分级纯化，醒酒效果不理想，同时也未对醒酒肽的醒酒作用做详细研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种花生粕醒酒肽的制备方法，该方法原料处理与多肽制备过程简单，不需碱溶酸沉步骤，纯化的活性多肽醒酒效果良好。

本发明提供的一种花生粕醒酒肽的制备方法，是以脱脂后的花生粕为原料，经浸提和水洗后，除去水溶性蛋白，所得沉淀按一定料液比加水后，先添加Amano SD-AY10蛋白酶酶解，灭酶后再加入Alcalase AF蛋白酶，在其最适宜条件下进行酶解，然后灭酶、离心、微滤和超滤，制得具有醒酒作用的花生粕多肽。具体步骤如下：

将脱脂后的花生粕粉末，按料液比1：10加入清水浸泡提取4h，4000r/min离心10min除去水溶性蛋白，取沉淀再加3倍体积的水，水洗2～3次，得到花生粕沉淀；将所得花生粕沉淀，按料液比1：10～15加入清水和Amano SD-AY10蛋白酶，加酶质量为花生粕沉淀质量的1/50；在50～60℃，pH9.0～10.0条件下酶解25～40min，升温到95℃灭酶10min，灭酶后冷却至40～50℃，再加入Alcalase AF蛋白酶，加酶的质量为花生粕沉淀质量的1/30～1/50，在pH7.5～9.0条件下酶解2～4h，酶解结束后升温到85℃灭酶；

将酶解液在5000r/min离心得到上清液，然后用孔径为0.22um的微滤膜进行微滤，所得滤出液用截留分子量为3000Da的超滤膜进行超滤，滤出液再用1000Da超滤膜超滤，收集1000～3000Da的截留液做为醒酒肽溶液。

该醒酒肽溶液可进一步浓缩成浓缩液冷藏，或喷雾干燥成粉末保存。

本发明的有益效果和优点：