[发明专利]大豆抗疫病基因RpsQ的分子标记Insert144及其应用

权利要求书

1.一种大豆抗疫病基因RpsQ的分子标记Insert144，其特征在于，其核苷酸序列如SEQID No.1所示。

2.根据权利要求1所述的分子标记，其特征在于，所述分子标记与大豆抗疫病基因RpsQ共定位于大豆3号染色体，且与RpsQ的遗传距离为0cM。

3.权利要求1或2所述分子标记的PCR引物，其特征在于，上游引物序列如SEQ ID No.2所示，下游引物序列如SEQ ID No.3所示。

4.一种鉴定大豆抗疫病基因RpsQ的方法，其特征在于，以待测植株样品的基因组DNA作为模板，用权利要求3所述的PCR引物进行PCR扩增，能扩增出SEQ ID No.1所示片段的植株样品为含有大豆抗疫病基因RpsQ的植株。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提取待测大豆的基因组DNA；

2)以待测大豆的基因组DNA为模板，利用所述PCR引物进行PCR扩增反应；

其中，PCR扩增反应使用的扩增体系以10μl计为：0.5μl浓度为50ng/μl的大豆基因组DNA模板，4μl的2×PCRMasterMix，浓度为10μM的上、下游引物各0.2μl，用ddH2O补足至10μl；

PCR扩增反应使用的反应条件为：94℃3分钟；94℃30秒，58℃30秒，72℃30秒，共35个循环；72℃10分钟；

3)结果鉴定：能扩增出SEQ ID No.1所示片段的植株样品为含有大豆抗疫病基因RpsQ的植株。

6.用于PCR检测抗疫病大豆的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求3所述的PCR引物。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、PCR反应缓冲液和标准阳性模板中的一种或多种。

8.分子标记Insert144在鉴定抗疫病大豆品种中的应用，其中所述分子标记Insert144的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

9.分子标记Insert144在制备转基因植物中的应用，其中，所述基因为大豆抗疫病基因RpsQ，所述分子标记Insert144的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

10.权利要求4或5所述的方法在大豆育种改良中的应用。