[发明专利]一种分离富集测定水环境中12种残留药物的方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种分离富集测定水环境中衡量残留药物的检测方法，特别地提供一种新的样品前处理方式和灵敏的检测方式，具体来说是样品前处理技术结合液质联用技术直接测定水样中12种常用药物的含量，属于水环境中微量有机污染物质残留安全检测领域。

【背景技术】

抗生素主要是由细菌、霉菌或其他微生物产生的次级代谢产物或人工合成的类似物，主要用于治疗各种细菌感染或致病微生物感染类疾病，为人类健康事业作出了巨大贡献。但是，近年来抗生素滥用现象十分严重，卫生部曾表示，在中国，患者抗生素的使用率达到70％，是欧美国家的两倍，但真正需要使用的不到20％。此外，抗生素的滥用除了体现在医药行业外，也体现在畜牧业、水产养殖业及工业上。

非甾体抗炎药是一类不含有甾体结构的抗炎药具有抗炎、抗风湿、止痛、退热和抗凝血等作用，在临床上广泛用于骨关节炎、类风湿性关节炎、多种发热和各种疼痛症状的缓解。目前非甾体抗炎药是全球使用最多的药物种类之一。全世界大约每天有3000万人在使用。

抗生素和非甾体抗炎药的滥用给我国地表水造成了严重的污染。有报道称，已有68种抗生素在我国的地表水环境中被检出，而且被检出抗生素的总体浓度水平与检出频率均较高，其中一些抗生素在珠江、黄浦江等地的检出频率高达100％，有些抗生素检出的浓度高达每升几百纳克，工业发达的国家则小于20纳克。这些在水环境中长期存在的抗生素会诱导微生物的耐药性，并最终通过食物链对人类健康构成潜在威胁，控制水环境中的抗生素已刻不容缓。

样品的前处理是关系到分析结果准确性的关键步骤，有调查显示在整个色谱分析过程中，30％的误差来源于样品前处理。由此可见，要保证分析结果的准确性，必须从样品前处理技术入手。随着人们对于水环境中抗生素问题的日益重视，有关水环境中药物残留检测的专利和论文已有公开发表。例如中国专利公开号CN101639466A公开了一种测定水环境中磺胺和抗生素的SPE-HPLC方法；中国专利公开号CN101696964A公开了一种针对水环境中氟喹诺酮的SPE-HPLC-荧光方法；中国专利公开号CN103336080A公开了一种测定水环境中四环素的HLB-HPLC-MS/MS方法；中国专利公开号CN103278587A公开了一种针对水环境中头孢的HLB-HPLC-MS方法等，这些方法的前处理方式主要是以固相萃取为主。水环境中物染污物的种类多，存在形态各异，浓度较低而且环境基质比较复杂，采取固相萃取为前处理方式，可以去除不需要的杂质，降低基质效应。但是，经固相萃取后，样品中待测物的浓度在一定程度上会被稀释，这在一定程度上限制了其使用。

超声辅助分散液液微萃取(UA-DLLME)是由Rezaee等人于2006年首次提出的前处理方法，具有操作简单，有机试剂用量少，富集倍数大等优点，操作简单、快速，污染少等优点。

随着水安全标准的日益提高，对于能够快速、灵敏、准确地测定水源中尽可能多的抗生素残留存在迫切需要，也是目前水环境领域中深入研究的重点课题之一。超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)是21世纪初发展起来的一种分析技术,它是一种结合了UPLC的高效分离能力与MS/MS的高灵敏度和极强专属性的分离检测技术，具有应用范围广、分离能力强、灵敏度高、分析速度快和自动化程度高等特点,目前已成为有机物分析,特别是药物分析的重要方法之一。

【发明内容】

本发明的目的旨在克服现有技术缺陷，提供一种同时测定水环境(饮用水、自来水、河水、污水处理厂进出水)中12种药物的方法。本发明采用超声辅助分散液液微萃取作为水环境样品的前处理技术，并利用超高液相色谱-质谱连用为检测器，克服了现有方法有机试剂消耗大、干扰多以及检测限等问题，能够快速检测水环境中酮洛芬、环丙沙星、替硝唑、托芬那酸、磺胺嘧啶、舒林酸、萘普生、磺胺甲恶唑、氯霉素、头孢呋辛酯、吡罗昔康、甲芬那酸12种药物的含量，适用对象广，测定结果灵敏，准确，干扰少。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种分离富集并同时检测水环境中12种药物的方法，其具体步骤如下：

超声辅助分散液液微萃取的条件的优化

选择环境中常见的药物(酮洛芬、环丙沙星、替硝唑、托芬那酸、磺胺嘧啶、舒林酸、萘普生、磺胺甲恶唑、氯霉素、头孢呋辛酯、吡罗昔康、甲芬那酸)，采用单因素试验，对UA-DLLME水中残留药物提取进行条件考察，包括萃取溶剂的种类和体积、分散剂的种类和体积、涡旋时间和超声时间等，选择最优的条件，得到在最优条件下对抗生素的最大萃取率；