[发明专利]一种银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：称取银杏酮酯，加入甲醇水溶液，涡旋提取后，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

2)参照品溶液的制备：称取芦丁对照品，加入甲醇水溶液溶解并定容，即得参照品溶液；

3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和参照品溶液，将获得的供试品溶液和参照品溶液的指纹谱图，与银杏酮酯的标准指纹谱图进行比较，根据相对保留时间，指认出共有特征峰，从而获得供试品溶液中黄酮类和有机酸类成分的指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述银杏酮酯加入的重量与所述甲醇水溶液加入的体积之比为1：80-120。

3.根据权利要求1所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述涡旋提取的条件为：提取时间：3-10min；涡旋转速：2500-3000r/min。

4.根据权利要求1所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1)或步骤2)中，所述甲醇水溶液为10-90％甲醇水溶液。

5.根据权利要求1所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：C18柱；柱温：30-40℃；检测波长：230-280nm；参比波长：400-500nm；流速：0.5-2.0ml/min；进样量：5-20μl；流动相：乙腈-0.1-0.4％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.1-0.4％磷酸水溶液；分析时间：70min；梯度洗脱。

6.根据权利要求5所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序为：0-10min，A相：B相体积比为12：88-13：87；10-13min，A相：B相体积比为13：87-15：85；13-20min，A相：B相体积比为15：85-16：84；20-30min，A相：B相体积比为16：84-21：79；30-40min，A相：B相体积比为21：79-23：77；40-50min，A相：B相体积比为23：77-30：70；50-70min，A相：B相体积比为30：70-75：25。

7.根据权利要求1所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液中黄酮类和有机酸类成分的指纹图谱中的黄酮类和有机酸类成分，采用电喷雾离子源高分辨串联飞行时间质谱法进行测定验证。

8.根据权利要求1-7任一所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，在银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分的质量检测中的应用。

9.一种银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分的质量检测方法，包括采用如权利要求1-7任一所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，得到银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱，再采用与银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法相同的条件得到银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分的标准指纹图谱，将得到的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱与银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分的标准指纹图谱进行相似度比较。

10.根据权利要求1-7任一所述的银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法，在银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分含量测定中的应用。

11.一种银杏酮酯中黄酮类和/或有机酸类成分含量的测定方法，包括以下步骤：

A)供试品溶液的制备：采用权利要求1-7任一权利要求所述银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法的步骤1)制备；

B)对照品溶液的制备：称取待测的黄酮类和/或有机酸类成分对照品中的一种或多种对照品，加入甲醇水溶液溶解并定容，即得单一对照品溶液或者混合对照品溶液；

C)采用高效液相色谱分别测定步骤A)中的供试品溶液和步骤B)中的对照品溶液，并采用外标法计算供试品溶液中黄酮类和/或有机酸类成分的含量。

12.根据根据权利要求11所述的银杏酮酯中黄酮类和/或有机酸类成分含量的测定方法，其特征在于，如步骤C)所述高效液相色谱法的色谱条件采用权利要求1-7任一权利要求所述银杏酮酯中黄酮类和有机酸类成分指纹图谱的检测方法的色谱条件。