[发明专利]一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法

权利要求书

1.一种藻酸盐组成的微胶囊中合成胞外蛋白质的方法，其特征在于采取以下步骤：

A)在微流体装置中分别注入外层水相、油相和内层水相，流速分别为0.01-0.05,0.1-0.3和4-5mol/L；所述外层水相是含1.0wt%十二烷基甜菜碱的超纯水，所述内层水相是含1.0wt%海藻酸钠的超纯水、0.6wt%的氯化钠和0.1wt%的荧光素葡聚糖的混合液；

B)调节内层水相的渗透压至200-500，在微管道的节点处形成水包油包水液滴；

C)在载玻片上将步骤B)得到的水包油包水乳化液与包含0.05-0.5mol/L氯化钙和0.05-0.5wt%聚乙烯亚胺的交联溶液接触，通过交联反应形成带聚离子复合膜的海藻酸钙小珠；

D)用大肠杆菌试剂盒中的酶和底物合成胞外蛋白质，以试剂盒中的绿色荧光蛋白的DNA编码为模板，DNA浓度为0.07-2ng/μL；

E)将模板DNA、转录酶和翻译酶及底物加入步骤A)中的内层水相，依次进行上述步骤A、B、C，得到半渗透微胶囊；

F)通过离心收集步骤E)得到的半渗透微胶囊，将含有底物的水相加入微胶囊悬浮液中，将微胶囊悬浮液置于培养皿中，在20-50℃下培养2-10小时使蛋白质合成，然后在5-10℃下培养12-24小时使蛋白质充分形成。