[发明专利]一种人参提取物FQR1及其在肿瘤免疫治疗中的应用在审
申请号: | 201510708335.3 | 申请日: | 2015-10-27 |
公开(公告)号: | CN105238755A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 杨兆勇;李霞;张志斐;汪康游;白利平;张紫浓;李亚东;金媛媛 | 申请(专利权)人: | 东营凤起生物科技发展有限公司 |
主分类号: | C12N5/0784 | 分类号: | C12N5/0784;C12N5/0783;A61K36/258;A61P35/00 |
代理公司: | 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 | 代理人: | 杨厚;王为 |
地址: | 257081 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人参 提取物 fqr1 及其 肿瘤 免疫 治疗 中的 应用 | ||
1.一种人参提取物FQR1,其特征是,取生晒参,高速组织捣碎机粉碎,分别两次加入10倍量10mMpH7.4的Tris-HCl(0.15MNaCl)缓冲液,充分搅拌,浸提12h,离心后收集上清液,合并两次的上清液,并向其中加入固体硫酸铵至终浓度为80%,搅拌均匀后4℃静置过夜离心,沉淀用蒸馏水洗涤3次后冻干,4℃透析过夜后冻干,即可收获人参提取物FQR1。
2.一种利用人参提取物FQR1诱导DC-CIK的方法,其特征是,所述方法依次包括以下步骤:
外周血采集:无菌抽取肿瘤患者外周血,肝素钠抗凝并充分混匀,避免出现凝血;
肿瘤抗原的获取:室温离心沉淀外周血,收集上层血浆,灭活备用;
单个细胞分离、收集:生理盐水稀释混匀所得细胞沉淀物,轻轻加至淋巴细胞分离液面,在650g条件下离心;离心结束后,加入生理盐水,混匀;室温离心沉淀,弃上清,生理盐水再次悬浮混匀,室温离心沉淀;
FQR1-DC-CIK细胞诱导培养:沉淀物用含人参提取物FQR1诱导培养基悬浮,并用白细胞稀释液稀释计数,置饱和湿度的二氧化碳培养箱中进行培养,期间根据细胞的生长状况适时换液扩增,直至细胞数量达到实验所需。
3.权利要求2所述的诱导方法,其特征是,FQR1-DC-CIK细胞诱导培养液中,所用人参提取物FQR1的浓度为0.01ug/ml~1mg/ml。
4.权利要求1所述人参提取物FQR1在制备肿瘤细胞免疫治疗药物中的应用。
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